不同温度胁迫下西瓜细胞水平的抗性机制研究

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1、学校代码：学号：分类号：密级為大營硕士学位论文题目：不同温度胁迫下西瓜细胞水平的抗性机制研究作者：王璧指导老师：江雪飞副教授专业：蔬菜学时间：二〇一五年五月StudyforresistancemechanismofwatermelonunderdifferenttemperaturestressatcelllevelAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinagronomyByWangJingSupervisor:JiangXue-feiMajor

2、:OlericultureSubmittedtime:May,2015海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：曰期年月勹曰学位论文版权使用授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允

3、许论文被查阅和借阅。学校可以为存在馆际合作关系兄弟高校用户提供文献传递服务和交换服务。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名：导师签名：日期：年《月”日日期：年：月？日本人已经认真阅读“高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交“高校学位论文全文数据库”中全文发布，并可按“章程”中规定享受相关权益。同意论文提交后滞后：口半年：口一年：□二年发布。论文作者签名铸导师签名：量日期：年月巧日日期知年亡月厂摘要研

4、究以同源不同倍性西瓜为试材，首先利用酶解法对西瓜叶片原生质体的制备条件进行优化，再用不同温度处理不同倍性西瓜叶片原生质体，通过测定原生质体细胞膜的导水系数变化评价细胞膜稳定性；利用荧光探针结合显微技术测定细胞内浓度变化，利用间接和直接荧光免疫显微观察细胞微管与微丝的结构变化，最终从细胞水平探讨不同倍性西瓜在不同温度胁迫下的可能抗性形成机制。主要结果如下：制备西瓜叶片原生质体的最佳条件为：纤维素酶离析酶溶于甘露醇中，酶解测定不同温度下，不同倍性西瓜细胞膜导水系数的变化发现：在°与°的低温处理下，二倍体细胞膜导水系数的增幅极显著小于四倍体，但在°°的高

5、温处理下，结果相反。说明二倍体在低温胁迫下，细胞膜稳定性好，即抗冷性强，但在高温胁迫下，四倍体细胞膜稳定性好，比二倍体更抗热；西瓜叶片原生质体荧光探针成功装载的最佳方案为：荧光染料，室温°，黑暗放置通过测定不同缓冲液下原生质体荧光强度，获知：低温°处理下，细胞内浓度升高，且大部分从胞外运输进入细胞内；通过比较不同倍性西瓜原生质体在不同温度处理下的荧光变化特点发现：低温°°处理下，二倍体细胞内变化比四倍体稳定，但在高温°°处理下，结果相反。说明细胞内的变化与西瓜本身抗性有关：抗性强，细胞膜稳定性好，胞内变化越稳定，反之，细胞膜稳定性差，胞内变化极不稳

6、定；确定西瓜叶片微管染色最佳方案为：固定，酶解测定不同倍性西瓜不同温度处理下微管的动态变化发现：二倍体在低温°处理后，微管解聚速度大于四倍体，高温°处理下，结果相反；但随着处理时间延长，二者叶片微管的解聚都较严重。说明微管参与了温度胁迫，短时间的胁迫下，微管的快速解聚和抗性相关；确定西瓜悬浮细胞微丝染色最佳方案为：将细胞置于固定液中，固定，酶解经温度胁迫处理后发现：微丝与微管类似，都是通过自身结构的动态改变适应外界环境，但同一温度处理下，微丝解聚要比微管显著。总之，细胞膜、胞内浓度及细胞骨架之间存在紧密联系。短时间的温度胁迫，抗性强的西瓜，细胞膜稳

7、定性强，微管也表现出快速解聚与重组，胞内浓度波动小；反之，微丝微管都严重解聚，导致细胞膜遭到破坏，胞内外渗，最终使细胞瓦解。关键词：西瓜；温度胁迫；导水系数；细胞内微丝；微管AbstractUsingautopolyploidwatermelonasmaterials，，°°°°，°，°，°°。°，。，watermenlon:cellfixedin1.85%p^"aformaldehyde+l%glycerol+2%tritonX-100for1.5h，，目录温度胁迫对植物生长发育的影响低温胁迫对植物生长发育的影响高温胁迫对植物生长发育的影响温度胁

8、迫对植株生理生化的影响温度胁迫对渗透调节物的影响温度胁迫对活性氧的影响温度胁迫对逆境蛋白变化的影响温度胁迫对植物细胞学方面