骨髓间充质干细胞对制动大鼠骨骼肌细胞bcl-2、bax蛋白表达的影响

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1、分类号：R493.2密级：不保密UDC：610学校代码：11065硕士学位论文骨髓间充质干细胞对制动大鼠骨骼肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响石浩指导教师李铁山教授学科专业名称康复医学与理疗学论文答辩日期2015年5月25日骨髓间充质干细胞对制动大鼠骨骼肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响中文摘要目的观察早期注射骨髓间充质干细胞(bonemesenchymalstemcells，BMSCs)对制动大鼠骨骼肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响方法取幼龄大鼠(80-100g)胫骨和股骨，分离培养大鼠BMSCs。用可塑性石膏制备右下肢管型固定肌萎缩模型，根据随

2、机数字分组法将24只大鼠分成假手术组，干细胞组，PBS组，干细胞组大鼠下肢制动48h后比目鱼肌局部多点注射1×106个BMSCs；PBS组大鼠下肢制动48h后注射等量磷酸缓冲液（phosphate-bufferedsaline，PBS）；假手术组大鼠下肢包裹相同重量石膏且不限制关节活动，48h后注射等量PBS，14天后各组大鼠拆除石膏取标本分析。结果培养中的大鼠骨髓间充质干细胞形态以梭形细胞为主，呈放射状排列的细胞集落，细胞生长旺盛，可连续稳定传代10代以上。实验中第4代骨髓间充质干细胞表面标志CD44，CD90均呈阳性表达，阳性率分别为95.84%，96.00

3、%，而CD34，CD45阳性率极低，其阳性表达率分别为3.81%，4.25%。Westernblot结果：与假手术组大鼠比目鱼肌中Bax和Bcl-2蛋白表达量[(0.14±0.11）;(0.81±0.06)]比较，干细胞组和PBS组Bax蛋白表达量[(0.41±0.08);(0.63±0.10)]明显升高，而两组Bcl-2蛋白表达量[(0.47±0.14);(0.22±0.13)]明显降低；干细胞组中Bax蛋白的表达较PBS组降低明显，而Bcl-2蛋白的表达量显著增高，差异有明显统计学意义意义(P<0.05)。结论制动大鼠骨骼肌早期注射BMSCs，可引起抗凋亡蛋

4、白Bcl-2上调、促凋亡蛋白Bax表达的下调。硕士研究生石浩（康复医学与理疗学）指导教师李铁山教授关键词：间充质干细胞，固定，骨骼肌，Bax，Bcl-2EffectsofbonemesenchymalstemcellsontheexpressionsofBcl-2andBaxintheatrophymuscleinducedbyimmobilization.AbstractObjective:Toobservetheeffectsofbonemesenchymalstemcells(BMSCs)ontheexpressionsofBcl-2andBaxinthe

5、atrophymuscleinducedbyimmobilization.Methods:Rats(80-100g)wereanesthetizedtocollectmarrowfromthefemursandtibias.BMSCswereisolated,culturedandpurifiedbythewholebonemarrowadherencemethod.Rats’righthindlimbwereimmobilizedfromthightofoot,resultinginimmobilizationofthekneeintheextensionpo

6、sition,andtheankleintheplantarflexionposition.24malemodelratsweredividedinto3groups.BMSCsgroupwereinjectedwith1×106BMSCsintothebellyofsoleusmuscleafterimmobilizingfor48hours.PBSgroupwereinjectedwithequalPBS.ControlgroupdidnotundergoanytreatmentexceptforequalPBS.Allratsweresacrificedf

7、oranalyzingafter14days.Result:BMSCsfromratswerespindlecell-based,showingradialcolonyarrangement.Cellskeptstronggrowthandcouldpassageincontinuousandstablemannerover10passages.Atthefourthpassage,BMSCswerepositiveofCD44(92.84%)andCD90(92.00%),butnegativeofCD34(3.84%)andCD45(5.25%).Weste

8、rnblotassayr