超排卵周期和自然周期中未成熟卵母细胞的体外成熟及玻璃化冷冻的研究

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1、分类号密级ＵＤＣ编号，讀似淨硕壬学位论文超排卵周期和自然周期中未成熟卵母细胞的体外成熟及玻璃化冷冻的研究－ｖＴｈｅＲｅｓｅａｒｃｈｏｎ化６ＩｎｉｔｒｏＭａｔ：ｕｒａｔｉｏｎａｎｄＶｉｔｒｉ巧ｃａ村ｏｎｏｆｔｈｅｉｍｍａｔｕｒｅｏｏｃｋｓｆｒｏｍｙｓｕｐｅｒｏｖｕｌａｔｉｏｎｃｙｃｌｅｓａｎｄｎａｔｕｒａｌｃｙｃｌｅｓ杨杰导师姓名黄文华教授专业名称人体解剖与组织胚胎学培养类型学术型论文提交日期２０１５年３月２４日南方医科大学２０１２级硕击学位论文超排卵周期和自然周期中

2、未成熟卵母细胞的体外成熟及玻璃化冷巧的硏究－ＴｈｅＲｅｓｅａｒｃｈｏｎ化ｅＩｎｖｉｔｒｏＭａｌ：ｕｒａｔｉｏｎａｎｄＶｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｉｍｍａｔｕｒｅｏｏｃｙｔｅｓｆｒｏｍｓｕｐｅｒｏｖｕｌａ村ｏｎｃｙｃｌｅｓａｎｄｎａｔｕｒａｌｃｙｃｌｅｓ课题来源：自选学位申请人杨杰导师延名黄文华教授专业違称人体解剖与组织胚胎学培养类型学木型培养层次硕壬所在学院基础匯学院答辩委员会主席答辩委员会委员２０１５年３月２４日广州硕去学位论文超排卵周期和自然周期中未成熟卵母细胞的体外成熟及玻璃化冷

3、冻的研究硕古研究生：杨杰指导老师：黄文华教授摘要第一章超排卵周期和自然周期中未成熟卵母细胞的体外成熟培养目的：在传统辅助生殖（ａｓｓｉｓｔｅｄｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ化ｃｈｎｉｑｕｅ，ＡＲＴ）治疗过程中，患者经控制性超排卵周期往往可获得大量卵母细胞，但在这些卵母细胞中有１５％由于未成熟而无法受精，最终这些未成熟卵母细胞多将被抛弃。本研究对ＡＲＴ治疗中控制性超排卵周期和自然周期中所得到的未成熟卵母细胞进行未成熟卵母细胞体外成熟（ｉｎｖｉｔｒｏｍａｔｕｒａｔｉｏｎ，ＩＶＭ），并对培养成熟后的卵母细胞进行卵胞浆内单精子注射（ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａ

4、ｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｅｃｔｉｏｎ，ＩＣＳＩ），然后观察其受精、胚ｊ胎发育及临床妊娠情况，目的在于评估这些未成熟卵母细胞的临床应用价值，提高卵母细胞利用率。材料巧旅：１．材料来源：本研究资料筛选了２０１０年１月至２０１４年１２月广州南方医科大学南方医院妇产科生殖医学中也实施未成熟卵母细胞体外培养的患者。共计１０９个周期。其中６４例为长方案促排卵ＩＣＳＩ周期２４８，共获得个不成熟卵母。细胞，４５例来自于自然周期，共获得４５个未成熟卵母细胞根据未成熟卵母细胞来源分为超排卵组和自然周期组。一２：．方法患者于前月经周期黄化中期开始使用促性腺素释放激素－ｏ

5、ｎａｄｏｔｒｏｎ－ｒｅａｓｎｏｒｍｏｎｅａｏｎｓｔｓａｉｌｅｉｉＧｎＲＨ予Ｗ调节，于降调后１４１５（ｇｐｇｈｇ降，）Ｉ摘要天来院抽血查Ｅ２、Ｐ、ＬＨ的水平及行Ｂ超检査，确定是否达到降调效果，如达到则加用促性腺激素（ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ，访１），根据Ｂ超监测及血清激素的水平调整Ｇｎ用量，当ｄ８ｉｍｎ卵泡有２个上时，当晚给予人绒毛膜促性腺激素（ｈｕｍａｎｃｈｏｒｉｏｎｉｃｏｎａｄｏｔｒｏｉｎｈｏｒｍｏｎｅＨＣＧ＾ＯＯＯＯＩＵ３６，，注射后小时在Ｂ超弓恃下穿ｇｐ刺取卵－。将收集的卵母细胞在３７Ｃ、６％Ｃ０２及饱和湿度条件下培养４６小时，

6、８０一然后在ＩＵ／ｍｌ的透明质酸酶作用下去除颗粒细胞，将有第极体的成熟卵母细胞进行常规卵胞浆内单精子注射（ＩＣＳＩ），剩余未成熟卵母细胞（ＭＩ期和ＧＶ’期）在常规Ｇ－山Ｓ培养液中巧Ｃ、６％Ｃ０－ＩＶＦＰ２及饱和湿度条件下培养２４３０小－时。将培养成熟的卵母细胞（ＭＩＩ期）进行常规ＩＣＳＩ授精并放于Ｇｌｐｌｕｓ培养‘３７Ｃ－液中、６％Ｃ０２及饱和湿度条件下培养１６１８小时后观察受精情况，将有明显２ＰＮ的正常受精胚胎继续胚胎培养，并于受精后２４小时和４８小时对胚胎进行胚胎质量评估。选取质量最优胚胎进行第Ｈ天常规胚胎移植剩余胚胎进行常，规冷冻－。移植后１２天检测血ＰＨ

7、ＣＧ，若妊娠，在胚胎移植后４周行超声检查，若出现妊娠案，则确定为临床妊娠。对成熟率、受精率、优良胚胎率和临床妊娠情况进行统计比较。结果：超排卵组患者平均年龄３４．４８±５．７，自然周期组患者平均年龄％．２９±７．２，组间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。超排卵组共有２４８个未成熟卵母细胞进行了ＩＶＭ１６３４５，最终成熟个；自然周期组共有个未成熟卵母细胞进行了ＩＶＭ，最