牦牛源御成门沙门氏菌对小鼠的致病性研究

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1、硕士学位论文题目牦牛源御成门沙门氏菌对小鼠的致病性研究作者雷占东完成日期2015年3月20日学科门类农学专业临床兽医学研究方向兽医临床微生物指导教师汤承教授学院（系、部）生命科学与技术学院授予学位日期年月日ThePathogenicityofSalmonellaOnarimonfromyakinmiceByLeiZhandongAThesisSubmittedToSouthwestUniversityforNationalitiesInFulfillmentoftheRequirementsForMasterDe

2、greeSupervisor：TangCheng(Professor)CollegeofLifeScienceandTechnologySouthwestUniversityforNationalitiesChengdu，610041，P.R.ChinaMarch2015基金资助项目1．“十二五”国家科技支撑计划课题:牛羊主要疫病综合防控技术集成、创新与应用（2012BAD13B06-4）2．西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目:牦牛源御成门沙门氏菌在小鼠体内的致病性研究（2014ZYXS57）牦牛源御

3、成门沙门氏菌对小鼠的致病性研究摘要牦牛是青藏高原特定环境下形成的特有物种，是当地牧民重要的生活和生产资料。沙门氏菌能够感染人类和多种动物，是重要的食源性致病菌,也是牦牛常见病原菌之一。沙门氏菌血清型众多，不同血清型沙门氏菌致病力差别很大，对宿主的危害程度不同。因此，对牦牛源沙门氏菌致病性的研究，对牦牛沙门氏菌病的防控和公共卫生学都具有重要意义。本实验室前期从健康牦牛粪便中分离得到31株沙门氏菌，属于8种血清型，分别为御成门沙门氏菌、都柏林沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、布利丹沙门氏菌、斯坦利沙门氏菌、奥雷

4、翁沙门氏菌和纽波特沙门氏菌，其中优势血清型沙门氏菌为肠炎沙门氏菌、都柏林沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌，但未对其致病性进行研究。本研究的目的是确定这8种血清型沙门氏菌对小鼠的致病性，并对御成门沙门氏菌在感染小鼠体内的动态分布、引起的组织病理学变化和所引起的免疫应答等方面进行研究，其主要研究内容和成果如下：1测定了8株不同血清型牦牛源沙门氏菌的毒力不同血清型沙门氏菌致病力差别很大，而牦牛源沙门氏菌的相关研究报道甚少，本研究随机选择本实验室保存的8个血清型牦牛源沙门氏菌各1株，以SPF级BALB/c雌性成年小鼠为实验动物，

5、通过直接灌胃的方法接种细菌，测定其半数致死量（LD50）。结果显示：御成门沙门氏菌、布利丹沙门氏菌、都柏林沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、纽波特沙门氏菌、伤寒沙门氏菌和斯坦利沙门氏菌等7株沙门氏菌的LD223345550分别为5×10、1.8×10、2.2×10、5.1×10、1.3×10、6.1×10和1.7×10CFU，而奥雷翁沙门氏菌不致死小鼠，灌胃接种2.7×108CFU/只后，小鼠仅有2/5个体出现精神沉郁、被毛逆立等一过性症状。从实验结果可见：除奥雷翁沙门氏菌外，7株菌的毒力普遍很强，其中御成门沙门氏菌和布利

6、丹沙门氏菌的毒力超强，仅数百个CFU经胃肠道途径感染即可致死未经抗生素预处理的成年小鼠，其致病机制值得进一步探讨。I牦牛源御成门沙门氏菌对小鼠的致病性研究2建立了御成门沙门氏菌感染小鼠的模型沙门氏菌的感染模型对研究其感染与免疫机理、药物及疫苗研发等具有重要意义，链霉素预处理的小鼠模型是最常用的，但该模型不能用于研究沙门氏菌如何突破肠道菌群的抵抗。本研究根据御成门沙门氏菌毒力测定结果，以5×105CFU/只剂量给未经抗生素处理的SPF级BALB/c雌性成年小鼠经灌胃方式接种御成门沙门氏菌，建立感染模型，先后进行5次

7、独立的重复感染试验。结果显示：御成门沙门氏菌感染小鼠的潜伏期为2～3d，病鼠主要出现精神沉郁、食欲减退、畏寒扎堆等症状，3～4d开始出现死亡，10d内感染小鼠全部死亡。剖检可见小鼠肝脏有弥漫性出血点，脾脏密布有大小不一的灰白色坏死灶，小肠内充满淡黄色浆液性内容物。5次重复感染试验均得到相似的结果。从研究结果可见：本研究成功地建立了御成门沙门氏菌对未经抗生素处理的BALB/c小鼠感染模型，稳定可靠，可复制性强。该模型在研究沙门氏菌突破肠道防御屏障的机制等方面具有显著的优势，为沙门氏菌感染与致病机制的研究提供了有价值

8、的新模型。3研究了御成门沙门氏菌在感染小鼠体内的动态分布病原菌定植、内化、增殖及在体内扩散蔓延规律是致病机制研究的重要内容。御成门沙门氏菌最早是从日本健康女性体内分离到，随后在日本、土耳其、墨西哥、以色列、德国以及中国等国家均有对该菌的研究报道，但关于该菌在体内的增殖情况还未见报道。本研究以御成门沙门氏菌的小鼠感染模型为基础，旨在研究其在感染小鼠体内的增殖及动态分布情况。