毛白杨遗传转化体系的优化和atpap2的转基因研究

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1、分类号学号？…綴馨对為音農違义參．．＇硕±学位论文毛白杨邊传转化体系的优化和心的转基因研究李春利—Ｉ－＇．‘．．＇Ｖ＾指导教师李义教授：专业学位农业推广硕±研究领域园艺研究方向遗传育种与分子生物学１＂１１■ｎｉｌ．Ｉ＾Ｌ．ＰＩＩ■Ｉ—ｌＩ—？Ｉｌ答辩日期二〇—五年五月１．又■．■Ｖ？—．．ＴＨＥＯＰＴＩＭＩＺＡＴＩＯＮＯＦＧＥＮＥＴＩＣＴＲＡＮＳＦＯＲＭＩＴＩＯＮＳＹＳＴＥＭＡＮＤＴＨＥＴＲＡＮＳＧＥ

2、ＮＩＣＲＥＳＥＡＲＣＨ０￥ＡｔＰＡＰ２ＩＮＰＯＰＵＬＯＵＳＴＯＭＥＮＴＯＳＡＢｙＬ－ｉＣｈｕｎｌｉＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂｐｙＰｒｏｆｅｓｓｏｒ－ＬｉＹｉＴｈｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙ虹ＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｌＵｍｅｎｔｏｆ化ｅＲｅｑｕｉｒｅｍ畑ｔｓＦｏｒＭ’ａｓｔｅｒｓＤｅｇｒｅｅｏｆＡｇｒｉｃｕｉｌｔｕｒｅＳｃｉｅｎｃ的ＣｏｌｌｅｅｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅｇ，ＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒ

3、ａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＣｏｍｐｌｅｔｅｄｉｎＡｐｒｉｌ２０１５，原创性声明本人郑重声明，是本人在导师的指导下，独立进：所呈交的学位论文行研巧工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名＾日：年！＾月＾｜：＾：）＾巧学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关

4、部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。＂＂（请在上方框内打Ｖ））签名学位论文作者（需亲笔：：訓弁口５月曰每＾杳刹办巧导师（需亲笔）签名：丰月鸣日目录目录满要１ＡＢＳＴＲＡＣＴ皿缩略词表Ｖ第一章文献综述１１杨树组织培养和转化体系的研究概况１１．１毛白杨简介１１．２杨树组织培养和转

5、化体系的相关研究１２花青素的生物合成及调控２２．１花青素的简介及功能２２３．２花青素的生物合成途径２．３调控花青素合成的主要转录因子４３花青素在植物上的应用７４本研究的目的及意义．．．７第二章毛白巧叶片巧ｇ和遗传转化体系的优化９１实验材料与试剂口１．１实验的植物材料１２１口．２实验茜株和质粒１１２．３職基１．４环境《件１３２毛白杨叶片再《体系的建立１３２１３．１姐培无菌苗的获得２．２毛白杨再生系统的建立１３３毛白杨转化体系的建立１４３．１含＾化４於基因的质粒

6、转入根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４１４Ｉ毛白杨遗传转化体系的优化和Ａ／Ｍ巧的转基因研究３．２农巧菌介导的叶盘转化法转化毛白杨１５４实验结果与分析１６４．１基本培养基的筛选１６４．２茎段继代生根培养基的筛选１７４．３叶片处理方式和激素配比对叶片分化的影响１７４．４生根培养基的筛选１８４．５菌液ＰＣＲ验证１９４．６影响毛白杨遗传转化的因素巧４／７转化结果２１５小结２２５．１叶片再繁体系的优化２２５．２影响遗传转化效率的因素２３第兰章毛白杨转＾化１Ｐ２基因的验证和花青素含量的測定２５

7、１植物材料２６＞２心货／２基因的同源性比较２６３转基因毛白杨的ＲＮＡ水平检测２６３．１毛白杨的ＲＮＡ提取２６３．２提取ＲＮＡ的质量检测２７４巧光定量ＰＣＲ２７４．１巧光定量ＰＣＲ引物设计２７一４．２ｃＤＮＡ第链的合成２８４．３普通ＰＣ民验证２９４－．４ＲＴＰＣＲ２９５花青素的提取和相对含量测定３０５．１花青素的提取３０５．２毛白杨花青素可见光最大吸收波长的确定３０６实验结果与分析３１６．１放基因的同源性比较３１目录６．２ＲＮＡ的提取３２６．３

8、引物的设计