毛白杨木质部特异性表达基因的筛选及ptozf基因转化

《毛白杨木质部特异性表达基因的筛选及ptozf基因转化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、麵。看電敬ＵＤＣ嫩（＞＜〇１￥｜ｔｈｅｓｉｓ—广一气＾寺山化文毛白杨木质部特异性表达基因的筛选及戶基因转化（中文题名）Ｘｍ－ｒｅｎｎｅｎｄｏＺＦＳｃｒｅｅｎｉｎｇｙｌｅＳｅｃｉｆｉｃＥｘｓｓｉｏＧｅａＰｔｐｐＴｒａｎｓｆｅｒｍａ村ｏｎｉｎｔｏ化ｗｅｗｔｏｓａ（英文题名）．刘蕾（作者姓名）■陆海教授指导教师申请学位级别生物化学与分子生物学学科专业名称植物分子生物学研究方向年５月论文提交日期２０１５年６月论文答辩日期．学位授予日期嘗辩委员会主席：评阅人：

2、＾＾：１化京抹《大学硕±论文同意发表的声明研究生院：本人及导师完全同意《中国优秀博硕±学位论文全文数据库＂＂出版章程》（ｔｕ下简称章程）及我校与中国学术期刊（光盘版）电子杂志社签定的《ＣＮＫＩ共建共享中国优秀博硕ｉ学位论文全文数据库（ＣＤＭＤ）和北京林业大学研究生院博硕：ｔ学位论文全文数＂＂据库（ＤＭＤ）协议书》下简称协议书）的有关内容，愿意将本人的硕±学位论文委托研究生院向中国学术期刊（光盘版）电子杂志社的《中国优秀博硕七学位论文全文数据库》投稿。所在学科为；生物化学与分子生物学，论文题目为：毛白杨木质部特异性表达

3、基因的筛选与戶ｔｏｉＦ的转化。希望《中国优秀博硕上学位论文全文数据库》给予出版，并同意在《中国博硕±学位论文评价数据库》和ＣＮＫ１系列数据库中使用，同意按章程和协议书规定享受相关权益。作者签名：导师签名：户伟如ｎ７ｓ永久联系地址（邮编）：永久联系电话：注‘：《中国优秀博硕ｉ学位论文全文数据库出版章程》巧从ｈｔｔｐ：／／ｇｒａｄｕａｔｅ，ｂｊｆｕ．ｅｕｄ．ｃｎ中学位Ｌ作／学位论义跨目Ｆ浏览独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢

4、的地方外，论文中不包括含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得北京林业大学或其它教育机构的学位或证一书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。、曰期又／￣＾‘＜？３＞签名：叫禱；关于论文使用授权的说明本人完全了解北京林业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可Ｗ公布论文的全部或部分内容，可Ｗ采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。做密的论文在解密后应巧守此规定）签名；叫為导师签名；＾稱日期：９刀作乂，巧邻

5、？巧要．）是我国北毛白杨（化ｐｕ如ｓＣａｒｒ方地区的常见树种，因其材质优良及抗性强，被广泛用于造纸等行业。木质部是维管植物的运输组织，另外还兼有机械支持作用。相对木质部发育相关的关键酶的基因而言，其特异性启动子元件与转录因子的研究还比较薄弱。为了探索调节杨树木质部发育的相关转录调控网络，可Ｗ运用酵母单杂交的技术寻找与相关启动子元件结合的蛋白。本研究选择了木质素合成途径关键酶基－－－？－－￣－因的ＡＣｂｏｘＣＴＧＴＴＧＴＧＡＧ：２６４２５５、ＡＢＲＥｂｏｘＡＣＧＣＧＴＧ２４２２３５（，）（，）－－－ｂｏｘＣＣＡＴＧＣＡＣ

6、ＴＡＡＧＴＴＣＣＴＡＧＴＧＴＣＡＴＣ３？１７２９２及Ｗ（，）作为诱巧序列，Ｗ毛白杨作为植物材料，构建了毛白杨酵母单杂交的ｃＤＮＡ文库和Ｈ个顺式作用元件的诱巧质粒，并ＷＡＣ元件的诱巧质粒对文库进行了初步的筛选，为后期研究调控毛白杨木质部发育的转录因子提供新资料。同时本研究还选取了木质部特异表达的巧基因，采用农巧菌介导法将构建好毛白杨ＡｏＺＦ基因的过表达载体与反义载体转化毛白杨，为后期研究该转录因子功能奠定基础，对于更深入了解木材形成过程的分子机制、性材改良的基因工程育种具有重要意义。具体实验结果如下：ＰＣ民１１ＷＧｆ／Ｓ基因片

7、段为模板基因，在其上游引物的５端分别加上一－－－ＡＢＲＥｂｏｘ、ＡＣｂｏｘ及Ｗｂｏｘ的ミ次重复序列，与下游引物同扩增ＧＷ基因Ｉ－片段ＡｂＡｉ质粒后再切除ＧＣＴｉＳ基因片段。，将该片段连到ｐ，即构建好报道子２构建了毛白杨酵母单杂ｃＤＮＡ文库－ｂｏｘ的诱巧酵母所建库容量交，含ＡＣ６分别为１．３Ｘ１０，且其中没有ｒＲＮＡ的污染，共筛选到５个候选蛋白；并对其在ＮＣＢＩ上进行Ｂｌａｓｔ比对，分析其可能的功能。３确定毛白杨转化的卡那霉素的最佳浓度为１５ｍｇ／Ｌ。将ｆｔｏＺＦ类基因的过表达载体与反义载体转入毛白杨中，均得到毛白杨完整的再生植株