林麝源铜绿假单胞菌外膜蛋白的提取及免疫原性的研究

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2、．碱壬学位论义：ｙ？．二尸林靡源铜绿假单胞菌外膜蛋白的提取及免－Ｗ＾疫原性的研究＊、Ａ？－ｂ、．．—、．＇．＇．、ＶＷＵＶ：衣＾．’－＇－、－、＇＇等－＇ｔ，ｆｌ、？：苛殷州．．Ｖ－或Ｖ－＇ｒ护辛？‘二巧‘；＇、．＇，■＾，＾．．：、＇如、／Ｖ於、：？、＊’＇某？指导教师，；熊焰教投＿＿／？－．Ｘ知去学科专业：预防兽医拿＇，＇’■ｆｒ护＇＇Ｘ＇巧究

3、方向；动物微生物与免疫学賓－．Ｖ＼．Ｙ一－■。，：一—／．＇ｒ－．Ｌ。：．？＇：＇护；—声．－，＇－；．－、，．－，，．－击？，，＇１、＊，，＊？？．－、■４＊？＇１、．？一－＊．？幸、＾－？方＇禾１Ｖ２０１５年６月１－－＇二＼、＇＾’？、乂＾＼’：一、．Ｖ．＇子．－：泉．异？；－？皆－ｉ／式、＇‘？一：ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉ

4、ｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＤｉｅｒｔａｔｏ打巧ｉＳｕｂｍｉｔｔｅｄｉｎａｒｔｉａｌｆｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｆｂｒｐＭａｓｔｅｒｄｅｒｅｅｇＳｔｕｄｙｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄａｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙｏｆｏｕｔｅｒｍｅｍｂｒａｎｅｒｏｔｅｉｎｏｆＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｉｎｏｓａｉｎｐｇＭｏｓｃｈｕｓｂｅｒｅｚｏｖｓｋｉｉＢｙＺ？ｈｏｕＹｉｎＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙ

5、ＰｒｏｔＹａｎＸｉｏｎｇＹ，ａａｉｉＳｉｃｈｕａｎＣｈｉｎａ，，化ｎｅ２０１５论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成ｉ。尽我所知？标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或果，除了文中特别加［＾集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学一位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研巧生签名：年月日关于

6、论文使用授巧的声明本人完全了解四川农业大学有关保留：学校有权保留并、使用学位论文的规定，即向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子脱允许论文被查闽和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可（＾＾用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。＂《研巧生签名：為片年月日导师签名：Ａ巧＾月日摘要一直一铜绿假单胞杆茜１＾＾来是困扰野生动物养殖的大难题，属较难防控的细茜性疾一病之。该菌具有较强的耐药性，感染机体后，可产生

7、多种奉力因子，其具有很强的致病作用，单独使用抗生素的治巧效果并不理想，送限制了抗生素的广泛使用。因此，合理的疫苗接种对该疫病的预防起着至关重要的作用。目前，我国还没有针对铜绿假单胞茜病的有批文的疫苗。本研究根据林鹿养殖场铜绿假单胞菌的分布情况通过动物攻毒，一试验，成功筛选出了株毒力最强的茜株作为试验菌株。经提取和纯化该菌株的外膜蛋白，并进斤免疫接种，从细胞免疫、体液免疫和攻毒保护Ｈ个方面来评估该菌株的免疫原性，并对免疫效果进行评价，期为林虑铜绿假单胞菌病的防控提供參考依据。

8、本文所开展的研巧和取得的结果如下：１．试验菌株的筛选试验选取本实验室从林靡体内分离并保存的７株铜錄假单胞菌一，并均用同菌液浓一株毒力最强的菌株－巧）度对试验小鼠进行攻毒，从中筛选出（ｓｐ株，最终，测得其６对小鼠的ＬＤｓｏ是６．７１１４ｘ１〇ＣＦＵ。２．外膜蛋白的纯化及鉴定－１９－通过试剂念提取ｓｐ株的外膜蛋白。经ＳＤＳＰＡＧＥ电泳分析，显示该方法提取的外膜蛋白有８个蛋白条带，其分子量分别约为１０４ＫＤ、７１ＫＤ、５２ＫＤ、４３田）、３６Ｋ