基于蛋白质组学技术对睡眠剥夺大鼠血清的初步研究

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1、分类号：密级：学号：20121305单位代码：10092硕士学位论文基于蛋白质组学技术对睡眠剥夺大鼠血清的初步研究单位：河北北方学院专业：药物分析学研究生姓名：郭兴道导师姓名及职称:张癸荣教授研究起止日期：2013.6-2015.2提交日期：2015.5分类号：密级：单位代码：10092学号：20121305基于蛋白质组学技术对睡眠剥夺大鼠血清的初步研究单位：河北北方学院专业：药物分析学研究生姓名：郭兴道导师姓名及职称：张癸荣教授研究起止日期：2013.6-2015.2提交日期：2015.5河北北方学院学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组

2、）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北北方学院所有。河北北方学院有权对本学位论文进行交流、公开和使用。导师签名：研究生签名：2015年6月18日河北北方学院研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。导师签名：研究生签名：2015年6月18日目录目录中文摘要…………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………

3、4英文缩写…………………………………………………………………7研究论文基于蛋白质组学技术对睡眠剥夺大鼠血清的初步研究前言………………………………………………………………8材料与方法…………………………………………………………9结果………………………………………………………………22附图………………………………………………………………27附表………………………………………………………………44讨论………………………………………………………………46结论………………………………………………………………52参考文献……………………………………………………………53综述睡

4、眠剥夺对大鼠学习记忆及中枢神经系统相关分子的影响……………………………………………………………60致谢………………………………………………………………...102个人简历………………………………………………………………...103中文摘要基于蛋白质组学技术对睡眠剥夺大鼠血清的初步研究摘要睡眠是人体最基本、不可或缺的生理活动，是从事其它活动的前提和基础。无论是生理、还是心理上，人体都无法摆脱睡眠而长期存在，睡眠质量直接关系到人体的身心健康。当代社会，由于高节奏、高速度和信息化发展模式带来一系列生活方式的变化，加之各种主客观原因如疾病、噪声等，使得睡眠剥夺的发生成为常

5、态，正日益成为医学研究的热点之一。睡眠剥夺带来神经系统、消化系统、心血管系统和免疫系统等多方面的不良后果，对神经系统的损伤尤为明显，表现为学习记忆能力降低、注意力下降及引起情绪和行为改变等。然而，睡眠剥夺引起机体损伤的确切原因和发生机理目前尚不清楚，深入研究睡眠剥夺相关分子并搜寻治疗靶标，对发现特异性治疗方法和调控药物均十分必要。有多种建模方法用于睡眠剥夺研究，如水环境法、药物刺激、轻柔刺激和强迫运动等，其中以水环境法最为经典。由于水环境法模型动物能观察到动物体重减轻、学习记忆能力下降和免疫力降低等现象，且异相睡眠时间减少、觉醒时间增加，而异相睡眠时间在恢复睡眠后

6、显著增加，觉醒时间则显著减少。因此，该方法系建立REM睡眠剥夺动物的较理想方法。本课题采用改良多平台水环境法（Modifiedmultipleplatformmethod，MMPM），选取大鼠，通过研究建立了24h快速眼动睡眠剥夺（Rapideyemovementsleepdeprivation，REMSD）模型。血清蛋白谱的改变是许多疾病最直接的后果之一。血清蛋白质组学（Serumproteomics）在研究疾病病理生理机制、药物作用靶点及早期诊断特异性标志物的发现等方面具有重要作用。本课题即利用所建立的睡眠剥夺模型，研究其血清蛋白质组学的变化情况。血清蛋白组成

7、复杂且比例悬殊，致使低丰度蛋白往往被高丰度蛋白掩盖，导致其分辨率降低。因此，对血清样本进行处理并去除高丰度蛋白以提高低丰度蛋白的比例，是进行相关研究最首要面对的难题。本研究首先系统考察了去除Wistar大鼠血清中高丰度蛋白的影响因素，1中文摘要优化并改良了有机溶剂沉淀法。在上述工作的基础上，最后应用血清比较蛋白质组学的方法，对快速眼动睡眠剥夺模型动物的血清蛋白表达变化情况进行了研究。本实验总体步骤及结果为：（1）大鼠一般情况：睡眠剥夺组大鼠毛发光泽下降，精神稍差，较亢奋。空白对照组和环境对照组大鼠精神状态良好、毛色整洁、光亮。24h睡眠剥夺对大鼠体重和学习记忆能力

8、无影响。（