不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动及P2X3受体影响的研究

不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动及P2X3受体影响的研究

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1、成都中医药大学2018硕士学位论文成都中医药大学(针灸推拿学院)二零一八届硕士研究生学位论文不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动及P2X3受体影响的研究ResearchonChrono-acupunctureonNerveElectricActivityinAcupointAreaandP2X3ReceptorofRatsinDifferentConditions研究生姓名:黄士其指导教师:蔡定均教授专业名称:针灸推拿学二〇一八年五月成都中医药大学2018硕士学位论文学位论文不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动及P2X3受体影响的研究ResearchonChrono-acupunctu

2、reonNerveElectricActivityinAcupointAreaandP2X3ReceptorofRatsinDifferentConditions黄士其指导教师姓名:蔡定均教授申请学位级别:硕士专业名称:针灸推拿学论文提交时间:2018.04论文答辩时间:2018.05二○一八年五月成都中医药大学2018硕士学位论文中文摘要目的:研究不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动的作用及其对穴区、背根神经节、脊髓P2X3受体的影响,以期从经穴反应性动态变化为切入点,揭示择时针刺镇痛的外周机制。方法:实验由三部分组成。(1)将SD雄性大鼠(清洁级)置于动物节律隔离单元,驯化7天后,将大

3、鼠随机分为空白组和空针组,每组根据处理时间的不同,分为ZT0、ZT4、ZT8、ZT12、ZT16、ZT20,六个亚组。在各时间点对空针组大鼠进行右侧“足三里”穴针刺,每5min行针一次,持续5min,留针30min,同时通过PowerLab对穴区腓总神经神经电活动进行记录,空白组不针刺,只记录神经电活动。(2)将驯化后的大鼠随机分为空白组和造模组。造模组在大鼠右侧足垫部皮内注射完全弗氏佐剂0.1ml,空白组注射等量的生理盐水。待模型制备成功后,将造模组随机分为模型组与模针组。在造模成功第2天,模针组于各亚组对应的时间点针刺患侧“足三里”穴,每5min行针一次,持续5min,留针30min,同时

4、通过PowerLab对穴区腓总神经神经电活动进行记录,空白组及模型组不针刺,只记录神经电活动。(3)将驯化后的动物按照实验二的方法分为空白组及造模组。待模型复制成功后将造模组大鼠随机分为模型组和模针组。造模成功的第2天,根据实验二统计结果,结合前期不同时间针刺镇痛研究结果选择效应最优和最差时间点进行实验。模针组于特定时间点针刺患肢“足三里”穴,每5min行针一次,持续1min,空白及模型组只在相应时间点作捆绑处理。第7天治疗结束后,采用免疫组化法检测不同组特征时间点“足三里”穴局部皮肤组织、背根神经节(L4-L6)、脊髓(L4-L6)中P2X3受体的表达。结果:1.生理状态下:①不同时间点针刺

5、可促进穴区局部神经放电次数。穴区局部神经放电次数:空针组与空白组比较,在ZT0、ZT8、ZT12和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.002、0.000、0.044和0.000;在ZT4和ZT16,差异不具有统计学意义,P值分别为0.470和0.237。②时间因素与各组穴区局部神经放电次数存在交互效应。在不同时间点,空针组与空白组比较,穴区局部神经放电次数差异具有统计学意义,P=0.000,P<0.05。1成都中医药大学2018硕士学位论文2.病理状态下:①不同时间点针刺可促进穴区局部神经放电次数,降低神经放电平均幅值。穴区局部神经放电次数:模型组与空白组比较,在ZT12和ZT16,差

6、异具有统计学意义,P值分别为0.002和0.000;在ZT0、ZT4、ZT8和ZT20,差异无统计学意义,P值分别为0.948、0.267、0.924、0.408。模针组与空白组比较,在ZT8和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.000和0.013;在ZT0、ZT4、ZT12、ZT16,差异无统计学意义,P值分别为0.314、0.665、0.188、0.631。模针组与模型组比较,在ZT4、ZT8、ZT12、ZT16和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.001、0.002、0.000、0.000和0.004;在ZT0,差异无统计学意义,P值为0.534。穴区局部神经放电平均幅值

7、:模型组与空白组比较,在ZT4、ZT8、ZT12、ZT16和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.000、0.000、0.007、0.009和0.002;在ZT0,差异无统计学意义,P值为0.093。模针组与空白组比较,在ZT0、ZT4、ZT12、ZT16和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.001、0.000、0.003、0.016和0.003;在ZT8,差异无统计学意义,P值为0

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