基于药对的不同治法对Lewis肺癌干预效应的比较研究.pdf

《基于药对的不同治法对Lewis肺癌干预效应的比较研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学位论文基于药对的不同治法对Lewis肺癌干预效应的比较研究ComparativestudyoninterventioneffectsofdifferenttherapeuticmethodsbasedondrugpaironLewislungcancer丁世宏指导教师姓名：由凤鸣教授申请学位级别：硕士专业名称：中医内科学论文提交时间：2018年5月论文答辩时间：2018年5月15日二○一八年五月成都中医药大学硕士学位论文中文摘要目的：选取四组药对：白花蛇舌草-半枝莲、半夏-茯苓、桃仁-当归、黄芪-麦冬，分别代表清热解毒法、化痰祛湿法、活血化瘀法、扶正固本法，通过比较四组药对代表的不

2、同治法对Lewis肺癌荷瘤小鼠肺腺癌细胞的干预效应，并从肿瘤免疫抑制微环境、荷瘤机体免疫和炎症水平、肿瘤转移等角度初步探讨干预效应的相关机制，为合理、有效运用相应中医治法干预肺腺癌提供初步的理论和实验依据。方法：1.C57BL/6小鼠荷瘤模型的建立：用1ml胰岛素注射器在小鼠左上肢腋下皮7肤皮下注射0.2mlLewis肺癌细胞悬液（浓度为1.5³10个/ml）。观察肿瘤细胞增殖情况，当小鼠皮下触及绿豆粒大小肿瘤即表明造模成功。通过病理切片观察组织形态评价模型的有效性。2.基于药对的不同治法对Lewis肺癌干预效应的比较研究：将造模成功的36只小鼠随机分为6组，分别为：模型、阳性、清热

3、解毒、化痰祛湿、活血化瘀、扶正固本组，每组6只。另选6只正常小鼠作为空白组。以造模成功当天为第0天（D0），从第1天（D1）起，连续给药15天。每天观察小鼠精神状态、活动度、毛发光泽及柔顺度、大小便状况等；D1称重后，从D2起，隔日称取小鼠体重，绘制体重变化曲线；从D5起，隔2日定时用游标卡尺测量肿瘤最长径a2及最短径b,以肿瘤体积=1/2（ab）表示肿瘤大小，绘制生长曲线。在D16摘瘤称重，计算抑瘤率，抑瘤率(%)=[1-(干预组平均瘤重/模型组平均瘤重)]³100%。剪取瘤组织分别进行组织病理学（HE染色）观察。3.基于药对的不同治法干预Lewis肺癌的相关机制：第16天动物称重

4、后，无菌条件下眼眶取血，采用ELISA法检测血清中IL-10、TNF-a浓度；摘瘤称重后，取一部分瘤体制作石蜡切片，免疫组化法检测肿瘤组织中TAMs(CD68阳性)的表达；WesternBlot法检测肿瘤组织中E-cadherin、Vimentin的表达。I成都中医药大学硕士学位论文结果：1.造模成功，成瘤率100%。肿瘤均位于小鼠左前肢腋下，用手可触及绿豆大小的结节，质硬，瘤体边界清楚，形状规则，活动度差。取材时观察到，原位瘤呈鱼肉色，质韧。肿瘤组织HE染色可查见肿瘤。2.摘取的组织HE染色均可查见肿瘤；各组均可改善荷瘤小鼠生存状态，减少肿瘤细胞核分裂象、降低肿瘤生长趋势，抑制肿瘤

5、体积增长，各组抑瘤率分别为阳性组（53.20%）、清热解毒组（47.29%）、活血化瘀组（43.35%）、化痰祛湿组（36.45%）、扶正固本组（18.23%）。3.药物干预后，与模型组比较，阳性组、活血化瘀组TAMs(CD68阳性)含量较低，具有显著差异（P＜0.05）；与阳性组比较，模型组、扶正固本组、清热解毒组TAMs(CD68阳性)含量较高，差异具有统计学意义（P＜0.05）；扶正固本组与活血化瘀组相比，TAMs(CD68阳性)含量较高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。阳性组、清热解毒组较模型组IL-10含量降低，化痰祛湿组、扶正固本组、活血化瘀组IL-10含量较模型组升

6、高；其中，活血化瘀组IL-10含量最高，与其余各组相比，均有显著差异（P＜0.05）；扶正固本组IL-10含量较模型组、阳性组、清热解毒组高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。与模型组比较，其余各组TNF-a含量均较低，其中，化痰祛湿组TNF-a浓度最低，与空白、模型、阳性、活血化瘀组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）；清热解毒组TNF-a浓度较化痰祛湿组稍高，但低于空白组、模型组、阳性组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；扶正固本组TNF-a浓度低于模型组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；清热解毒组TNF-a浓度低于活血化瘀组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。波形

7、蛋白相对定量结果排序为（由高到低）：扶正固本组＞空白组＞清热解毒组＞活血化瘀组＞化痰祛湿组＞阳性组＞模型组；扶正固本组与化痰祛湿组、阳性组、模型组相比均有显著差（P<0.05)；清热解毒组与模型组相比有显著差异（P＜0.05)；模型组和空白组相比有显著差异（P＜0.05）。E-钙粘附蛋白未测出。结论：1.不同治法对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长具有一定的良性干预效应，均可抑制Lewis肺癌的生长。其中清热解毒法抑瘤效果最好，活血化瘀法次之，化痰祛湿法再次