基于tilling的小麦淀粉合成关键基因突变体发掘与表达分析

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1、密级：论文编号:中囯农业科学院学位论文基于TILLING的小麦淀粉合成关键基因突变体发掘与表达分析MutantIdentificationandCharacterizationofStarchSynthesisKeyGenesinWheatBasedonTILLING硕士研究生：李晓指导教师：刘录祥研究员申请学位类别：农学硕士专业：作物遗传育种研究方向：小麦诱发突变与生物技术育种培养单位：作物科学研究所研究生院提交日期：2015年5月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽

2、我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：PUT年J~月”日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体

3、上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:时间：上年士月巧日中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目基于TILLING的小麦淀粉合成相关基因突变体发掘与表达分析小麦诱发突变与论文作者李晓专业作物遗传育种研究方向生物技术育种指导教师刘录祥研究员培养单位（研究所）作物科学研究所硕（博）姓名职称单位专业签名导师评硕导口博导口阅硕导口人博导口答辩主席硕导口中国科学院遗传与发张爱民教授小麦遗传育种博导V育生物学研究所硕导口中国科学院遗传与发张爱民教授小麦遗传育种博导〃育生物学研究所硕导口李自超教授中国

4、农业大学水稻遗传育种博导V答硕导口中国农业科学院作物邱丽娟研究员大豆基因资源博导V科学研究所辩硕导口中国农业科学院作物毛龙研究员作物生物信息博导^科学研究所委硕导口中国农业科学院作物徐云碧研究员玉米分子育种博导V科学研究所员硕导口博导口硕导口博导口会议记录（秘书）刘云川论文答辩时间地点2015年5月28日作科所育种楼209密级:论文编号:中国农业科学院学位论文基于TILLING的小麦淀粉合成关键基因突变体发掘与表达分析MutantIdentificationandCharacterizationofStarchSyn

5、thesisKeyGenesinWheatBasedonTILLING硕士研究生：李晓指导教师：刘录祥研究员申请学位类别：农学硕士专业：作物遗传育种研究方向：小麦诱发突变与生物技术育种培养单位：作物科学研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationMutantIdentificationandCharacterizationofStarchSynthesisKeyGenesinWheatBasedonTILLINGM.

6、S.Candidate：XiaoLiSupervisor：ProfessorLuxiangLiuMagor：CropGeneticsandBreedingSpecialty：InducedMutationsandBiotechnologyforWheatBreedingMay2015摘要本实验室已经利用EMS构建了小麦品种京411的M2代突变群体，并从Agp2B、Wx-A1、SSⅡ-A、SSⅡ-B和SBE1等5个淀粉合成关键基因中筛选获得多个点突变。在此基础上，本研究利用TILLING技术筛选SSⅣ基因的突变体，并在

7、M3代检测SSⅣ以及Agp2B、Wx-A1、SSⅡ-A、SSⅡ-B、SBE1等6个基因的点突变对其基因表达水平和籽粒淀粉含量的影响。主要结果如下：1.利用TILING技术筛选京411的M2代突变群体，获得SSⅣ基因的54个点突变，SSⅣ基因在群体中的突变密度为1/198.82kb。其中1个无义突变、2个剪接突变和22个错义突变。无义突变C2188T，使相应肽链在第269位提前终止。2个剪接突变均发生在第7内含子第一个碱基，即第3825位，G转换为A。22个错义突变中，PARSENP预测T1991C、C2254Y、C4

8、061T和G6438A可能将严重影响蛋白质功能。2.选择预测可能影响蛋白质功能的13个SSⅣ基因突变单株繁殖成M3代，包括1个无义突变，2个剪接突变和10个错义突变。无义突变的M3代纯合单株中SSⅣ基因的表达非常微弱，可能无义突变使相应mRNA因提前终止翻译而被降解。剪接突变的M3代纯合单株中检测到5种不同的mRNA剪接方式：保留第6、7、8内