不同抗虫棉品种bt蛋白表达的研究及转抗除草剂基因gatgr79棉花新种质的创制

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5、键因素。该研究以SouthernBlot和ELISA技术为主要试验方法，研究了具有我国自主知识产权的新型抗草甘膦除草剂转基因棉花和抗虫棉花外源功能基因在棉花基因组中的整合情况，以及Bt杀虫基因的代际遗传和Bt杀虫蛋白代际表达的稳定性，并取得了如下结果：1.利用SouthernBlot方法，研究了2000-2系谱材料的抗虫基因遗传稳定性。HindⅢ和EcoRⅠ两个限制性内切酶消化基因组后的杂交结果表明，该系谱的所有抗虫材料，均含有单一插入位点的外源抗虫基因表达盒，且该表达盒能随着棉花基因组传递给其后

6、代，保证了转基因性状的遗传稳定性。2.利用ELISA方法，检测了鲁棉系和2000-2系材料的抗虫蛋白表达情况。结果表明Bt基因虽然在不同的材料间的表达上存在差异，但总体而言可以在此两个系谱的抗虫材料的稳定高效表达，体现了转基因性状的表达稳定性。3.利用SouthernBlot方法，研究了转GAT和GR79双基因抗草甘膦除草剂棉花的外源基因整合情况。共检测了9个不同的转基因事件，其中4个转基因事件被检测含有两个插入位点，5个转基因事件被检测含有单一插入位点。4.通过利用不同探针，对不同棉花基因组进行

7、SouthernBlot，总结了一套适用于棉花的SouthernBlot技术。关键词：抗虫棉；蛋白表达；Southern；抗除草剂；拷贝数ITheResearchonBTExpressionofInsect-resistantCottonsandCreationofNewGermplasmofGAT/GR79TransgenicCottonResistanttoHerbicideAbstractWiththedevelopmentofagri-biotechnology,theindustrial

8、izationofgeneticallymodified(GM)cropsismoreandmoreextensive,transgenicbreedinghasbecomeamainapproachofcropbreeding.Inthegeneticallymodifiedcrops,thegeneticstabilityoftransgenictraitsandexpressionlevelstabilityofforeigngeneshavebeengottenspecia