slgr基因调控番茄果实成熟的机理研究

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1、分类号：：单位代码密级：学号：博士学位论文基因调控番茄果实成熟的机理研究研宄生：潘晓琪指导教师：罗云波教授合作指导教师：傅达奇副教授串请学位类别：工学博士专业领域名称：食品生物技术研究方向：果蔬采后生理与分子生物学所在学院：食品科学与营养丄程学院分类号：：单位代码密级：学号：博士学位论文基因调控番茄果实成熟的机理研究研究生：潘晓琪指导教师：罗云波教授合作指导教师：傅达奇副教授串请学位类别：工学博士专业领域名称：食品生物技术研究方向：果蔬采后生理与分子生物学所在学院：食品科学与营养工程学院二零一五年五月独创性声明本人声明所呈交

2、的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研宄成果。尽我所知，除了文中己经注明引用和致谢的内容外，论文中不包含本人和其他人已经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我丨同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：时间年月日关于学位论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定。本人同意中国农业大学有权保存及向国家有关部门和机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人同意中国农业

3、大学将本学位论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》或《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。保密的学位论文在解密后应遵守此协议）学位论文作者签名时间丨年孓月日导师签名时间：？月日摘要番茄是一种典型的果实成熟突变体，这种突变源于番茄基因’非编码区一段长度为序列的缺失，导致基因的异常表达，但蛋白的编码信息并未发生改变。目前，关于基因的异常表达导致的番茄果实不成熟的机理及相关生物化学方面的变化仍知之甚少。本研宄采用高通量蛋白质组学研究方法，辅以技术以及其他分子生物学和生理研宄手段，揭示影

4、响番茄果实成熟的机制。本研宄的主要结论如下：基因的表达模式分析。以野生型番莉果实和突变体番茄果实，以及和突变体番茄果实为材料，探索况说基因的表达水平。结果显示况基因在番茄突变体果实中的表达水平显著高于野生型果实，同时显著高于其在和价番茄果实突变体中的表达水平，说明基因在番茄突变体中的过表达具有一定的特异性。参与番茄果实乙烯信号转导。利用外源乙炼对野生型番茄果实进行处理，检测结果显示基因的表达受到乙烯的诱导；番茄乙烯生物合成途径的重要酶基因和乙烯信号转导组件基因的表达水平受到基因过表达的抑制；和基因的表达也受到基因的影响，且与

5、基因之间存在相互影响，说明参与果实乙烯信号的转导和反馈。和蛋白与蛋白在体外互作。研宄以为钓饵蛋白，对破色期突变体番茄果实酵母文库进行筛选，共得到个与蛋白潜在相互作用的蛋白。根据以往对功能的分析推测，结合其亚细胞定位信息，从中选取了个受体类激酶蛋白一一和利用酵母双杂交方法对这一潜在的互作关系进行验证。结果显示，和蛋白能够分别与蛋白在体外互作。番茄突变体果实蛋白质组学研究。釆用技术对破色期突变体果实的蛋白组学表达谱进行研究和分析。将分析结果整合为一个涵盖诸多细胞代谢和调控途径的网络，直观系统的掌握突变体番茄果实的代谢特征。对番茄

6、果实成熟性状的影响。以蛋白质组学分析结果为线索，探索突变体果实成熟相关的代谢特征，检测差异表达蛋白编码基因的转录水平，建立基因的过表达与突变体果实的代谢特征及不成熟性状之间的联系。同时，利用技术证实了这些性状确由基因的异常表达导致。总之，本研究进一步揭示了影响番茄果实成熟的功能机制，为参与番茄果实乙烯信号转导途径提供证据，并且进一步证实在番茄果实中极有可能存在一个介导的独特的乙烯信号转导与调控机制。关键词：番茄，果实成熟，基因沉默AbstractGreen-ripe(Gr)tomatocarriesadominantmuta

7、tionandyieldsanonripeningfruitphenotype.Themutationresultsfroma334-bpdeletioninthe5'-flankingregionofafunctionallyunknowngeneattheGrlocus.However,theectopicexpressionofSIGRintheGrmutantdoesnotalterthesequenceoftheprotein-codingregion.TheputativeinfluenceofSIGRgene-

8、deletionmutationonbiochemicalchangesunderlyingthenonripeningphenotyperemainslargelyunknown.Here，，’目录第章文献综述番茄果实成熟机理研宄番茄果实成熟相关突变体植物激素对番茄果实成熟的影响番瓶的研