igf-i和gsh对不同季节绵羊细管冻精质量的影响

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1、分类号：Ｓ８２３．９学校代码：１０７５８密级：公开学号：１２３５０２０２７６．、乂：杂赛Ｍ舉硕±学位论文ＩＧＦ－Ｉ和ＧＳＨ对不同季节绵羊细管冻精病量的影响ｏｆ－ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓＩＧＦＩａｎｄＧＳＨｏｎｕａｌｉｔｏｆｏｖｉｎｅＳ化ａｗｆｒｏｚｅ打ｓｅｍｅｎｑｙ？ｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｅａｓｏｎｓ研究生姓名唐淑红—导师姓名及职称黄俊成研究寅合作导师姓幸及职称学位口类级别农学硕去专业名称动物遗传育种与繁殖研究方向家畜繁殖生物技术所在学院动物科学学院

2、新疆？乌鲁木齐二〇—五年六月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知１，除了文中特别加注和致谢的地方外，论文中：＾标不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得新疆农业大一学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。＂觀＜１研究生签名；若时间：年＾月曰／ｙ关于学位论文使用授权的说明、目本人完全了解新疆农业大学有关保留使用学位论文的规定，Ｐ：新疆农业大学有权保留并向国家有关部口或

3、机构送交论文的复印件和电子文档，可レッ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，允许论文入被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编有关数据库进行检索，可公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名：咬浪（ｂ时间；－年＆月ｆ曰ｐ〉时间：月（日Ｌ本研究由以下项目资助国家自然科学基金（项目编号：U1203381）自治区科技计划项目（项目编号：201111113）自治区科技援疆项目（项目编号：201291147）的部分研究成果课题主持人：黄俊成研究员（新疆畜牧科学院）IG

4、F-I与GSH对不同季节绵羊细管冻精质量的影响摘要绵羊是我国重要的经济动物，为人类提供所需的毛、肉等产品。目前，利用冻精进行人工授精、体外受精等手段可提高绵羊的繁殖效率，同时还可降低饲养成本。然而绵羊冻精，特别是非繁殖季节绵羊冻精质量较差，导致冻精的利用率较低。目前仍未找到适合绵羊精子生理特性的冷冻稀释液。为改善全季绵羊冷冻精液品质，本研究分别在繁殖季节（11月）及非繁殖季节（6月）对7只特克赛尔公羊进行采精，并将同季节不同个体精液混和。在冷冻稀释液中分别添加IGF-I和GSH，用一步稀释法制作细管冻精。精液解冻后，分别温育0、1及2h，应用SYBR-14/PI荧

5、光双染法、低渗肿胀实验和吖啶橙染色分别测定精子的顶体膜、质膜和DNA完整率。利用解冻精子进行体外受精、体外培养，并测定卵裂率和囊胚率。共同探索不同季节条件下对绵羊冷冻精子质量的影响，以及添加IGF-I和GSH对繁殖季节及非繁殖季节冻精质量的影响，为提高冻精利用效率提供理论依据。结果如下：1、不同季节（繁殖季节、非繁殖季节）对冷冻解冻后精子质量的影响：繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜的完整性以及体外受精后的卵裂率和囊胚率都显著高于非繁殖季节。2、在冷冻稀释液中添加不同浓度IGF-I（0、50、100、150、250ng/mL）对繁殖季节冻精质量的影响：添加50、1

6、00、150ng/mLIGF-I精子顶体膜完整率在解冻初期显著高于对照组（P<0.05）。添加100ng/mLIGF-I精子质膜及DNA完整率在解冻温育1h时显著高于其对照组（P<0.05），而添加150、250ng/mLIGF-I显著降低精子顶体膜及质膜的完整率（P<0.05）。因此在冷冻稀释液中添加100ng/mLIGF-I可提高繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜、DNA的完整性。3、在冷冻稀释液中添加不同浓度IGF-I（0、50、100、150、250ng/mL）对非繁殖季节冻精质量的影响：添加100ng/mLIGF-I在初解冻、解冻后温育1及2h时能显著提

7、高精子顶体膜完整率（P<0.05）。添加100、150ng/mLIGF-I在初解冻及解冻后温育1h时能显著提高精子质膜完整率（P<0.05）。添加250ng/mLIGF-I在解冻后温育1、2h时显著降低精子DNA完整率（P<0.05）。添加100、150ng/mLIGF-I可提高非繁殖季节冻精解冻后体外受精的卵裂率。因此在冷冻稀释液中添加100ng/mLIGF-I可提高非繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜的完整性，提高体外受精后的卵裂率。4、在冷冻稀释液中添加不同浓度GSH（0、1、2、2.5、3mM）对繁殖季节冻精质量的影响：添加1mMGSH在初解冻及解冻后温育

8、1h时能提