ifn-λ1-3 mrna实时荧光定量pcr方法的建立及ifn-λ1的表达与呼吸道病原关系的初探

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1、分类号Ｒ７２密级公开ＵＤＣ６１０学校代码１０５５５或考义葦嚇ＵＮＣＨＩＮＡＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＯＵＴＨ硕±学位论文（专业学位）－－ＰＣＲ方法ＩＦＮＸ１３ｍＲＮＡ实时蒙光定量Ｎ－的建立及巧Ｘ１的表达与呼吸道病原关系的初探研究生姓名：刘淑萍指导教师、职称：钟礼立教授合作导师、职称：段招军研究员专业学位类别（领域）：临床医学研究方向：儿童呼吸道感染所在学院：湖南省人民医院二—五年五月０＊＇＇＇？－：－．

2、．‘－占？；＇人？．，，嚇虑＃文爹ＵＨ１ＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＯＵＴＨＣＨＩＮＡ－巧ＮＸ＾３ｍＲＮＡ实时焚光定量ＰＣＲ方法的建立－及ＩＦＮＸ１的表达与呼吸道病原关系的初探论文作者签名：於作聲指导教师签名：论文评阅人１：黃黎，教授，硕导，中南大学湘雅睽院评阅人２；李云，教巧，硕导，湖南＃人民民院答辩委员会主席；杨作成，教巧，请导，中南大学湘雅附Ｓ侯院委员１；张坚松，教巧，硕导，湖南师范大学睽学協一民院委员２；殷小成，教授，硕导，亩华大学附属第

3、委员３：祝益民，教巧，博导，湖南省人民戾院委员４＝率云，教巧，硕导，湖南省人民民院答辩日期；２０１５年０５月２１日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名

4、：爷月；日＾南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（博／硕）±学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得其它、：单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留使用学位论文的规定，即学校有权保留学位论文，允许学位论文被査阅和借阅；学校可Ｗ公布学位论文的全部或部分内容；，可Ｗ采用复印、缩印或其它手段保留学位论文学校可根据国家或湖南省有关部口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕

5、±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论。文，解密后适用该授权＾作者签名：峰月々曰导师签名：年月曰Ｔ先心Ｗ■ｆ气－－－入Ｘ１ＩＦＮ１３ｍＲＮＡ实时巧光定量ＰＣＲ方法的建立及ＩＦＮ的表达与呼吸道病原的关系的巧探中文摘要一－Ａ－ＰＣＲ方第部分ＩＦＮ１３ｍＲＮＡ实时巧光定量法的建立目的；－建立人ＦＮ－Ｘ１－３型ｍＲＮＡ实时巧光定量ＰＣＲ（Ｒ

6、ｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ）Ｉ检测方法。方法：ＩＦＮ－？ｄ－３型ｍＲＮＡ的基因序列合成特异性引物及探针根据人，－－－－ｍＲＮＡ标准品用体外转录方法制备ＩＦＮＷ３的，建立人ＩＦＮＩ１３型ｍＲＮＡ实时焚光定量ＰＣＲ检测方法。结果：－ＩＦＮ？Ｊ－３型ｍＲＮＡ的载量与对应的ＣＴ值有良好的线性关系；０扩增效率均在９０％－１００％之间；灵敏度分别是：ｌｘｌ〇ｃｏｉｅｓ／阵、ｐｘｉｘｉｌｌ〇ｃｏｉｅｓ／Ｌ、ｌｌ〇ｃｏｉｅｓ／ｉＬ变异系数均小于２％；各型间无ｐｎｐｉ；交叉反应。结论：ＦＮ－

7、Ｘ－３ＡＰＣＲ检成功建立了Ｉ１型ｍＲＮ实时萊光定量测方法。Ｉ－Ｘ第二部分ＩＦＮＩ的表法与呼吸道巧原的关系的初探目的；－Ａ了解呼吸道上皮细胞中ＩＦＮ１表达水平与呼吸道病原之间的关系，为开拓儿童呼吸道病毒感染新的治疗方法提供基础数据和科学根据。方法：一？１．采集祁州地区２０巧年７月２０１４年６月为期年间就诊于柿州市第一人民医院儿科的急性呼吸道感染住院患儿鼻咽拭子标本共４８９份，并按照年齡及标本采集日期配对的原则，同时在该院儿保口诊收集健康儿童鼻晒拭子２４４份为设为对照组，将

8、收集的鼻咽拭２ｍｌ病毒保存液并－８子加入置于（ＴＣ冰箱保存。－Ａ２．采用所建立的萊光定量ＰＣＲ方法检测样本中ＩＦＮ１ｍＲＮＡ、－－－管家基因甘油酵－３磯酸脱酶（ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ３ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｄｒｏｅｎａｓｅＧＡＰＤＨｎｉＲＭｙｇ），另外同时对本批标本进行常见病原（常见呼吸道病毒化