cd4~+cd25~+调节性t细胞在pcv2持续性感染中的作用

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1、^^JfAfAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI硕士学位（毕业)论文CD4+CD25+调节性T细胞在PCV2持续性感染中的作用学位申请人：王晓波指导教师：宋勤叶教授学科专业：预防兽医学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年五月二十四日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得河北农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献

2、均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：7他年上月讲日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解河北农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权河jb农ik大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关教抿库讲行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：i成丨良导师签名：系签字日期：仞比年上月列日签字曰期：年上月碎日学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话:通讯地址：邮编:分类号：S8

3、55.3单位代码：10086密级：公开学号：2012360++CD4CD25调节性T细胞在PCV2持续性感染中的作用++TheroleofCD4CD25RegulatoryTCellsinthePersistentInfectionofPorcineCircovirsType2学位申请人：王晓波指导教师：宋勤叶教授学科专业：预防兽医学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年五月二十四日摘要猪圆环病毒2型（porcinecircovirustype2,PCV2）引起的猪圆环病毒相关疾病（PCV2-associateddiseases,PC

4、VAD）是危害当今世界养猪生产的重要传染病之一。PCV2可以导致猪的免疫功能抑制并且在宿主体内持续性感染。但目前对PCV2持续++性感染的机制了解仍然不够。CD4CD25调节性T细胞（regulatoryTcells,Tregs）在病原微生物致病和持续性感染中发挥着双重作用。本文拟通过动物实验，分析++CD4CD25调节性T细胞的改变对机体免疫功能及病毒感染状态的影响，诠释++CD4CD25调节性T细胞在PCV2持续性感染中的作用。将168只6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为4组，即空白对照组（Blank）、PCV2组（PCV2）、Foxp3-shRNA+

5、PCV2组（shRNA+PCV2）和pcDNA3.1-Foxp3+PCV2组5.7（Foxp3+PCV2），每组42只。除Blank组外，其余各组均通过腹腔感染1.010TCID50PCV2；于感染前2d与感染后12d，shRNA+PCV2组和Foxp3+PCV2组分别接种表达Foxp3-shRNA和表达Foxp3的真核质粒（100μg/只）。感染后PCV2组与Foxp3+PCV2组的Foxp3基因的平均表达量高于shRNA+PCV2和空白对照组的表达量，Foxp3+PCV2组肺脏内的病毒载量高于PCV2组和shRNA+PCV2组。++PCV2感染后4d

6、，CD4和CD8T细胞的特异增殖能力均下降，Foxp3表达量的++增加可暂时提高CD4T细胞的特异增殖能力，但对CD8T细胞的特异增殖能力具++有长期抑制作用。PCV2对CD4CD25调节性T细胞的增殖活性影响不显著，当增加++Foxp3的表达时，仅能短暂地提高CD4CD25调节性T细胞的特异增殖活性。进一步应用ELISA检测血清中细胞因子水平的结果显示，PCV2感染引起IFN-γ的水平降低，Foxp3+PCV2组和PCV2组的IL-10、TGF-β1、IL-17A浓度显著高于空白组和shRNA+PCV2组的水平（P＜0.05）。流式细胞术分析结果表明，P

7、CV2引起感染初++---++-+期脾脏内CD3CD4CD8、CD3CD4CD8细胞含量下降，导致CD3CD4CD8和+++++LowCD3CD4CD8T细胞亚群平均含量下降，但CD4CD25CD127调节性T细胞亚++-+-+群的平均含量上升。Foxp3表达量的增加可使CD3CD4CD8T细胞、CD3CD4CD8+++T细胞和CD3CD4CD8T细胞亚群的进一步短暂降低。当抑制Foxp3表达时，--+CD3CD4CD8细胞含量则上升。++PCV2可以引起CD4CD25Tregs数量增加，促进IL-10、TGF-β1和IL-17A的分泌；当增加Foxp3表

8、达量时，肺脏内的PCV2载量升高，机体的特异和固有细胞免疫++进一