cajal间质细胞凋亡在先天性巨结肠症及其同源病发病中的作用

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1、授予单位代码10089学号或申请号20122135HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位Cajal间质细胞凋亡在先天性巨结肠症及其同源病发病中的作用研究生:杨晓锋导师.•李索林教授徐伟JlL副教授专业:外科学二级学院:第二医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容

2、相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应法律责任。研究生签名导师签章级学院领导盖焉^‘‘v年河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。目录中文摘要…………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………

3、…………4英文缩写………………………………………………………………….7研究论文Cajal间质细胞凋亡在先天性巨结肠症及其同源病发病中的作用前言………………………………………………………………….8材料与方法………………………………………………………….8结果………………………………………………………………….13附图………………………………………………………………….17附表………………………………………………………………….26讨论………………………………………………………………….27参考文献

4、…………………………………………………………….30综述Cajal间质细胞、结直肠运动与先天性巨结肠症及其同源病………………………………………………………………36致谢…………………………………………………………………46个人简历…………………………………………………………………47中文摘要Cajal间质细胞凋亡在先天性巨结肠症及其同源病发病中的作用摘要目的先天性巨结肠症(Hirschsprung’sdisease,HD)及其同源病(Hirschsprung’sallieddisease,HAD)是

5、小儿外科常见的消化道运动功能障碍性疾病,正常消化道运动源自肠神经节细胞、Cajal间质细胞(interstitialcellsofCajal,ICCs)和平滑肌细胞的协同合作,研究证实ICCs与HD相关,但其具体机制尚不十分明确。本研究通过免疫荧光双标记技术检测HD及HAD结肠肌层ICCs的分布以及caspase-3和bcl-2的表达情况,确立不同病变肠管肌层中ICCs的凋亡情况,以探讨其在先天性巨结肠症及其同源病发生、发展中的作用。方法选取河北医科大学第二医院2014年2月至2015年2月收治并手

6、术治疗的HD病儿15例和HAD病儿13例,所有病儿均经肛管直肠测压、钡灌肠、乙酰胆碱酯酶染色及术后病理组织学检查确诊,切取HD病变结肠痉挛段、移行段及扩张段和HAD近端与远端的全层肠壁组织作为各实验组。另选取10例正常结肠病儿标本作为对照组。应用免疫荧光双标记技术检测不同病变肠管肌层中ICCs分布密度以及ICCs中caspase-3和bcl-2的表达情况,并分别予以计数,应用SPSS13.0统计学软件予以统计分析,以P<0.05为差异有统计学意义。同时,应用电子透射显微镜观察不同病变肠管肌层中ICC

7、s超微结构的凋亡样改变。结果1不同病变肠管肌层ICCs的分布应用免疫荧光技术检测不同病变肠管及对照组肌层ICCs的分布密度(个/视野),与对照组(17.8±1.5)相比,HD组中痉挛段(5.8±1.1)、移行段(10.0±1.8)、扩张段(13.1±2.1)和HAD组中远端(8.6±1.6)肠管肌层内ICCs分布密度均明显减少(P<0.05);仅HAD组中近端肠管肌层内ICCs分布密度(16.5±2.4)与对照组相比无统计学意义(P>0.05)。HD组中各病变肠管肌层内ICCs分布密度两两比较,差异

8、均有统计学意1中文摘要义(P<0.05);HAD组中近端与远端相比也存在明显差异(P<0.05)。2不同病变肠管肌层ICCs中caspase-3的表达应用免疫荧光双标记技术检测不同病变肠管肌层内ICCs中caspase-3阳性表达的百分率,与对照组6.3±4.3%相比,HD组中痉挛段77.6±13.8%、移行段53.6±10.2%及扩张段31.9±8.0%和HAD组中近端23.6±6.8%与远端57.2±12.1%肠管内caspase-3阳性表达的ICCs百分率均明显

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