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时间:2019-03-12
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1、分类号:R614密级:不保密UDC:610学校代码:11065硕士学位论文AMPK在电针预处理脑缺血/再灌注中的作用蔚海霞指导教师王明山教授学科专业名称麻醉学论文提交日期2015年3月20日论文答辩日期2015年6月6日答辩委员会主席于金贵教授AMPK在电针预处理脑缺血/再灌注中作用摘要目的评价单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)激活剂在电针预处理小鼠脑缺血/再灌注中的作用。方法健康青年雄性C57BL/6小鼠216只,2-3月龄,体重20-25g,采用随机数字表法,将其分为6组(n=36):对照组
2、(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、电针预处理百会穴组(EAB组)、电针预处理无关穴位组(EAC组)、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核苷酸(AICAR)组(A组)及电针预处理百会穴加AICAR组(EAB+A组)。制备小鼠全脑缺血再灌注模型,缺血15min后恢复灌注。于再灌注4、24和72h时,每组随机取12只小鼠处死,取海马组织,光镜下观察病理学结果,采用TUNEL法测定细胞凋亡率,选用Westernblot法检测磷酸化AMPKα(p-AMPKα)的表达。结果与C组比较,I/R、EAB、EAC、A及E
3、AB+A组各时点海马神经元凋亡p-AMPKα表达水平增高(P<0.05,P<0.01);与I/R组比较,EAB、A及EAB+A组各时点海马神经元凋亡率降低,p-AMPKα表达上调(P<0.05);与EAC组比较,EAB、A及EAB+A组各时点海马神经元凋亡率降低,p-AMPKα表达上调(P<0.05)。结论AMPK激活剂及电针预处理可上调p-AMPKα表达水平,减少神经元凋亡,减轻小鼠全脑缺血/再灌注损伤。硕士研究生蔚海霞指导教师王明山教授关键词:环AMP依赖性蛋白激酶类;电刺激疗法;再灌注损伤
4、;脑EffectofAMPKonelectroacupuncturepretreatmentincerebralischemia/reperfusionABSTRACTObjectiveToevaluatetheeffectofAMP-activatedproteinkinaseactivatoronelectroacupuncturepretreatmentincerebralischemia/reperfusionmice.MethodsTwohundredandsixteenmaleC57
5、BL6mice,aged2-3months.weighing20-25g,wererandomlydividedintosixgroups(n=36each)usingarandomnumbertable:controllgroup(groupC),I/Rgroup(groupI/R),electro-acupuncturepretreatmentgroup(groupEAB),shamelectro-acupuncturegroup(groupEAC),AICARpretreatmentgro
6、up(groupA)andelectro-acupuncturecombinedAICARpretreatmentgroup(groupEAB).TheglobalcerebralI/Rwasproducedby15minfollowedbyreperfusion.Twelvemicewerechosenandsacrificedineachgroupat4,24and72hofreperfusion.TheirhippocampalCAlregionwasdissectedformicrosc
7、opicexamination,detectionofneuronalapoptosisrate(byTUNEL)andexpressionofphosphorylatedAMPKa(p-AMPKa)(byWesternblot).ResultsComparedwithgroupC,neuronalapoptosisrateandtheexpressionofp-AMPKαwassignificantlyincreasedateachtimepointinI/R,EAB,EAC,AandEAB+
8、Agroups(P<0.05,P<0.01).ComparedwithgroupI/R,neuronalapoptosisratewassignificantlydecreasedandtheexpressionofp-AMPKαwasup-regulatedateachtimepointinEAB,AandEAB+Agroups(P<0.05).ComparedwithgroupEAC,neuronalapoptosisratewassignificantlydecreasedandtheex
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