6种苯系物对仿刺参呼吸树和肠组织的氧化胁迫和神经毒性

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1、分类号密级UDC编号硕士学位论文6种苯系物对仿刺参呼吸树和肠组织的氧化胁迫和神经毒性高士博(1261001)指导教师姓名殷旭旺副教授专业名称生态学论文答辩日期2015年6月5日学位授予日期2015年7月THISFORTHEMASTERDEGREEOFSCIENCETheOxidativeStressandNeurotoxicityof6KindsofBTEXActivitiesinRespiratoryTreeandIntestineofSeaCucumberApostichopusjaponicusSupervisor:Prof.XuwangYINMaste

2、rcandidate:ShiboGaoINSTITUTEOFAQUACULTUREANDLIFEDALIANOCEANUNIVERSITYDALIANLIAONINGP.R.CHINAJune2014摘要摘要本文以我国黄、渤海重要底栖生物，仿刺参（Apostichopusjaponicus）为受试生物，采用半静水式试验方法，设置3种不同浓度（1/5、1/25、1/125的96h–LC50）的苯、甲苯、乙基苯、邻–二甲苯、间–二甲苯和对–二甲苯处理健康仿刺参，采用实时荧光定量PCR和酶活试剂盒分别检测仿刺参过氧化氢酶（CAT）基因在仿刺参呼吸树、肠组织中的相对表

3、达量和酶活性变化，谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）基因在呼吸树、肠组织中的相对表达量，乙酰胆碱酯酶（AChE）活性变化。研究苯系物对仿刺参呼吸树、肠组织的氧化胁迫作用及神经毒性。实验结果发现：与空白对照组相比，各苯系物处理组的仿刺参呼吸树和肠组织中CAT酶活性和cat基因相对表达量变化显著，具有显著的剂量—效应关系；苯、甲苯、乙基苯、邻–二甲苯对呼吸树中CAT活性具有诱导作用，其中乙基苯的诱导倍数最高，为12.0~19.8倍；6种苯系物对肠组织中CAT活性具有抑制作用，抑制程度大小顺序为：邻–二甲苯>乙基苯>对–二甲苯>甲苯>间–二甲苯>苯。6种苯系物造成仿刺参呼

4、吸树、肠组织中GPx基因相对表达量显著变化，并具有显著的剂量—效应关系；其中，苯、邻–二甲苯、对–二甲苯导致呼吸树中GPx基因mRNA表达极显著下调，下调倍数为2.6～41.7倍；甲苯、间–二甲苯导致呼吸树中GPx基因mRNA表达极显著上调，上调倍数为2.6～86.4倍。邻–二甲苯、间–二甲苯、对–二甲苯处理组肠GPx基因mRNA表达极显著下调，下调倍数为1.2～38.5倍。6种苯系物导致仿刺参呼吸树、肠组织中AChE酶活性显著变化；其中，苯、甲苯、乙苯对仿刺参呼吸树、肠两种组织主要表现为诱导作用，而邻–二甲苯、间–二甲苯、对–二甲苯则主要表现为抑制作用。上述

5、实验结果表明：6种苯系物造成仿刺参呼吸树、肠组织的氧化胁迫，可能导致2种组织的氧化损伤，并对仿刺参呼吸树、肠具有神经毒性作用。以上研究结论可为苯系物对仿刺参的生物毒性评价提供基础数据。关键词：仿刺参；苯系物；氧化胁迫；神经毒性；实时荧光定量PCRIAbstractAbstractThepresentstudyisaimedtoevaluatetheoxidativestresseffectsandneurotoxicitiesofBTEXsonseacucumberApostichopusjaponicus,whichwasoneofimportantbent

6、hicorganismsintheYellowSeaandBohaiSeaofChina.Threedifferentconcentrations(1/5,1/25,1/125of96–LC50)ofbenzene,toluene,ethylbenzene,o–,m–,p–xylenewereselectedtotreatthehealthyA.japonicusindividualsusingsemi-staticwaterexperimentalmethod.Theactivitiesofcatalase(CAT)andacetylcholinestera

7、se(AChE),detectedbyusingenzymeactivitieskit,andrelativeexpressionlevelsofcatandglutathioneperoxidase(GPx)genes,detectedbyquantitativereal-timePCR,inrespiratorytreeandintestineofA.japonicas.TheresultsshowedthattheactivitiesofCATandexpressionlevelsofcatgeneinrespiratorytreeandintestin

8、ewereremarkablychan