12份特异附子株系的综合鉴定与评价

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1、两南科技大学研究牛令位论文12份特异附子株系的综合鉴定与评价年级____________2012姓f,曹玲丽屮1,77:位级別硕士//业__________植物学桁驂教师_________侯大斌ClassifiedIndex:U.D.C:SouthwestUniversityofScienceandTechnologyMasterDegreeThesisTheComprehensiveIdentificationandEvaluationStudieson12copiesofspecificstrainsa

2、coniteGrade2012CandidateGaoLingIiAcademicDegreeAppliedforMasterSpecialityBotanySupervisorProf.HouDabinMay.25.2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研九工作及取得的研宄成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得西南科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己

3、在论文中作了明确的说明并表示了谢意。签名：,於雨曰期：一7寻M关于论文使用和授权的说明本人完全了解西南科技大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文的复印件，允许该论文被查阅和借阅；学校可以公布该论文的全部或部分内容，可以米用影印、缩印或其他复制手段保存论文。(保密的学位论文在解密后应遵守此规定）西南科技大学硕士研究生学位论文IV摘要附子为毛茛科植物乌头（AconitumcarmichaeliiDebx.）的子根，有毒，味辛、甘，性大热，具有回阳救逆，补火助阳，逐风寒湿邪的功效，是著名四川道

4、地药材，在我国传统中医应用中有着不可替代的地位。长期以来，附子栽培上是以“乌药”进行无性繁殖，这导致其多种变异类型的种源混杂种植现象严重，这将难以保证药用附子在中医药临床应用中的用药安全与用药效果，因此选育高产优质的附子品种，并对其进行系统鉴定与评价非常有必要。本课题组前期已选育出12份农艺性状特异性较强的附子株系，本研究以江油附子主栽品种为对照，运用生药学鉴定法，薄层色谱法，高效液相色谱法，热分析法和AFLP分子标记法对12份附子株系进行综合鉴定，并考察其农艺性状，最后根据农艺性状和质量性状进行综合比较评

5、价，为12份附子株系的进一步开发利用奠定坚实基础。本论文主要研究结果如下：（1）农艺性状考察：对照品种H7、H14的5个性状（株高，茎鲜重，子根数，叶鲜重，子根鲜重）的测量值均偏低。株系H1、H5的综合农艺性状明显优于江油对照品种，同时还表现出较高出苗率和较低病死率。株系H9、H10的综合农艺性状次之，有较低病死率，但出苗率表现偏低。其余株系综合农艺性状和出苗率，病死率表现中等偏低水平。（2）原植物形态特征：对照品种和参试株系的茎秆性状均未表现出明显差别，但叶片性状则表现显著差异。叶片形状表现为掌状三全裂或

6、裂至基部，中央裂片3裂或5裂至中部，其小裂片有不同程度浅裂；两侧裂片2深裂近中部或基部，其内侧与外侧小裂片均有不同程度的分裂。所有小裂片呈楔形，边缘均有缺刻，各裂片间密集或较稀疏。叶尖表现急尖，渐尖或钝形。（3）子根性状：株系H5和对照H7的子根形状规则，且综合性状表现优良，具较高经济价值；H11综合子根性状表现较差；其余株系的子根综合性状表现中等。株系H9的子根呈不规则状，但综合性状表现出明显优势。（4）显微结构：对照品种和参试株系的叶片，茎，子根显微结西南科技大学硕士研究生学位论文V构均表现相似，与乌头

7、属植物的显微特征相符。（5）薄层色谱指纹图谱：对照品种和参试株系的薄层色谱图呈现7个共有特征斑点，构成附子的薄层色谱指纹图谱。7个斑点颜色深浅不一，表明附子株系间存在显著内在质量差异，根据该差异可达到初步鉴别的目的。（6）生物碱含量及高效液相色谱指纹图谱：对照品种H7和H14的双酯型生物碱，单酯型生物碱，总生物碱含量均处于中等偏下水平。株系H5、H8双酯型生物碱优势明显，H1单酯型生物碱优势明显，H1、H2总生物碱优势明显，其余株系各项生物碱含量表现中等或偏低。对照品种和参试株系的高效液相色谱图可作为其特征

8、指纹图谱，可用于附子株系间鉴定。（7）热分析指纹图谱：对照品种和参试株系的子根样品在升温过程中均表现出2次大的失重过程，分别为水分脱附过程和燃烧过程。DSC曲线放热峰峰形的有无及峰温呈现出显著差异，该差异可以用于附子株系间的鉴别。对照品种和参试株系的热分析图可作为其特征指纹图谱，可用于附子株系及种质资源间的鉴定。（8）AFLP分子标记：用对照品种和参试株系的嫩叶提取DNA基因组，9对随机选择性引物进行AFLP分析