黄颡鱼两种类固醇合成酶复制基因部分cdna的克隆及ee2对其表达的影响

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1、-、、.-、’、%？；；‘&^^VVVM�(碩士学位论文I•..»J黄颡鱼场种真闻酵合成醃复制基因部分cDNA的充窿及EE2对其来汰的彩吻JL汝.-效.“>、.、::•、...‘、、，2:�m-•.“IX指导教师：李英文教授：....少,'.义d：'A'!•‘'•'•、.'"、I专业名称：动物学研究方向：动物生理学；：y•:::；1>泰、、C..、•).T,.‘.上！[f、-'.》•、.，、'•‘、!.:•、�T-.••.SA“.逆.、..A'i^'i《..•‘、：：^mm：.二.>,®_-I,V、SA二:f豫SJ、•o.v‘.r*..K、、c•、、Ic:•.「十、-

2、>iI，’，M/;..•••，、u-*•.‘T_,.,*•>'i,M,.u..t，-,*‘}'r..yJt,»二〇一五年四月*、.；、、•/独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得重庆师范大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名h签字日期••j年（月�o日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解重庆师范大学有关保留、使用学位论

3、文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权重庆师范大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保密（），在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密。(请只在上述一个括号内打>学位论文作者签名签字日期：6月…日重庆师范大学硕士学位论文黄颡鱼两种类固醇合成酶复制基因部分cDNA的克隆及EE2对其表达的影响指导老师：李英文教授硕士研究生：吴迪专业名称：动物学研究方向：动物生理学所在学院：生命科学学院重庆师范大学二零一五年四月AThesisSubmittedtoCh

4、ongqingNormalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterMolecularcloningofpartialcDNAsequencesofduplicategenesencodingsterodigogenicenzymesinPelteobagrusfilvidracoandtheirexpressionsinresponsetoEE2Supervisor:LiYingwen(Professor)Candidate:WuDiMajor:ZoologyField:Animalp

5、hysiologyCollege:CollegeoflifesciencesChongqingNormalUniversityApril,2015重庆师范大学硕士学位论文中文摘要黄颡鱼两种类固醇合成酶复制基因部分cDNA的克隆及EE2对其表达的影响摘要性类固醇激素在硬骨鱼的性别分化、繁殖和生长等过程中都扮演着极其重要的角色，特别是雌激素在性别分化和性成熟过程中起决定性作用。而P450c17和20β-HSD在合成鱼类性类固醇激素和孕激素的过程中不可或缺。本研究通过RT-PCR及RACE方法，从三峡库区重要的经济养殖鱼类——黄颡鱼中克隆了P450c17和20β-HSD的复制基因：P

6、450c17α-II和20β-HSD-I的部分cDNA序列。序列分析结果发现，P450c17α-II和20β-HSD-I片段长度分别为1203bp和1198bp。多重序列对比显示，黄颡鱼P450c17α-I、-II均具有P450c17保守的Ono序列、十三肽和血红素结合区域。20β-HSD-I、II均具有20β-HSD保守的辅酶结合区域、辅酶腺苷酸接合位点、稳定β-折叠的结构、部分激活位点、底物接合位点、催化部位和酰胺烟酰胺环结构。相似性分析表明，黄颡鱼P450c17α-I、-II均与同为鲇形目的斑点叉尾鮰和南方鲶相似性最高，与四足类相似性较低。20β-HSD-I、-II与斑点

7、叉尾鮰和革胡子鲶相似性最高，与四足类相似性较低。随后，本研究还对上述基因的表达模式进行了研究，结果表明，黄颡鱼P450c17α-I、-II在精巢和卵巢中均有表达，且P450c17α-II在头肾中也有表达；而20β-HSD-I、-II呈现的是泛表达模式，在多种组织均有表达。季节表达模式研究结果表明，黄颡鱼雄鱼和雌鱼P450c17α-I在1月表达量最；20β-HSD-I在11月表达量最；而P450c17α-II、20β-HSD-II在5月表达最高。随着现代人类日常活动的日益频繁，内分泌干扰物带给