黄曲条跳甲化学感受基因的鉴定与表达分析

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1、硕士学位论文黄曲条跳甲化学感受基因的鉴定与表达分析作者姓名__________王正兵学科专业农业昆虫与害虫防治指导教师林进添教授所在学院__________农学院论文提交日期2015年4月学位论文原创性声明木人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文11—1特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果。与我--同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表:小J谢居、。作者签名:指导教师签名学位论文版权使用授权书木人完全了解

2、学校有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留送交论文的S印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印'缩印或扫描等复制手段保存、'汇编学位论文。冋意学校将本人的学位论文提交清华大学中国学术期刊（光盘版）电子杂志社全文出版和编入CNKI《中国知识资源总库》，传播学位论文的全部或部分内容=(保密的论文在解密后应遵守此规定）木学位论文属于：□保密，在____年解密后适用本授权书。W■不保密.同意在校园M上发布，供校内师生和与学校冇共享协议的单位浏览。(请在以上相应方框内打“1')Identificationan

3、dExpressionprofileanalysisofChemosensoryGenesinPhyllotretastriolata(Fabricius)ADissertationSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：WangZhengbingSupervisor：Prof.LinJintianZhongkaiUniversityofAgricultureandEngineeringGuangzhou,China分类号：学校代码：11347学号：2012209040200

4、3秘密★年仲恺农业工程学院硕士学位论文黄曲条跳甲化学感受基因的鉴定与表达分析作者姓名：王正兵指导教师姓名、职称：林进添教授学科专业名称：农业昆虫与害虫防治研究方向：昆虫分子生物学论文提交日期：年月日论文答辩日期：年月日学位授予单位：仲恺农业工程学院学位授予日期：年月日答辩委员会成员：主席：刘开启委员：刘开启、马骏、贺华良摘要黄曲条跳甲Phyllotretastriolata（Fabricius）是十字花科蔬菜的主要害虫之一，在中国南方地区严重危害十字花科蔬菜的生产。目前黄曲条跳甲的防治主要依靠化学防治，但农药的过

5、度使用导致抗药性产生和食品安全隐患。因此，需要发展新型的防治策略。应用引诱化合物或驱避化合物是害虫防治的发展方向之一，研究黄曲条跳甲的化学感受基因可以加深对化学感受基因的认知，同时也为将来对其功能研究奠定科学基础。本论文对本实验室前期构建的黄曲条跳甲转录组数据进行生物信息学分析，通过同源性分析和cDNA末端快速扩增技术（RACE）从黄曲条跳甲转录组数据库中鉴定化学感受相关基因并获得基因全长；应用生物信息学方法分析候选基因的结构和特征，并构建系统发育进化树；应用实时荧光定量PCR技术，研究化学感受基因在不同性别的嗅

6、觉器官与非嗅觉器官的表达差异。通过以上研究，获得以下结果：1）黄曲条跳甲化学感受基因鉴定和生物信息学分析应用生物信息学方法和RACE技术共鉴定16个化学感受基因，其中气味结合蛋白（Odorant-bindingproteins，OBPs）基因3个，化学感受蛋白（Chemosensoryproteins，CSPs）基因2个，气味受体（Odorantreceptors，ORs）基因1个，离子型受体（Ionotropicreceptors，IRs）基因7个，感受神经膜蛋白（Sensoryneuronmembranepr

7、oteins，SNMPs）基因2个，味觉受体（Gustatoryreceptors，GRs）基因1个。通过选取部分昆虫的化学感受基因与鉴定所得的黄曲条跳甲化学感受基因构建系统发育进化树，分析显示黄曲条跳甲化学感受基因多与赤拟谷盗等鞘翅目昆虫的化学感受基因的进化关系较为接近。（1）PstrOBP1、PstrOBP2、PstrOBP3分别与松墨天牛Monochamusalternatus的MaltOBP4、MaltOBP3和赤拟谷盗Triboliumcastaneum的TcasOBP19d同源性最高，分别为52%、4

8、1%、42%。（2）PstrCSP1与PstrCSP2分别与与黄粉甲Tenebriomolitor的TmolCSP3和赤拟谷盗T.castaneum的TcasCSP6同源性最高，分别为57%和37%。（3）PstrSNMP1和PstrSNMP2分别与松山甲虫Dendroctonusponderosae的DponSNMP（AFI45066.1）和赤拟谷盗T.castaneu