陆地棉一个外源bt抗虫基因的鉴定和染色体定位

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1、（柳＊号—為嗦泉養义４全日制专业学位硕±学位论文一个外源Ｂ陆地棉ｔ抗虫基因的鉴定和染色体定位安育伟■‘、’■？■＇－－—■？’？、＿．一＇’．―‘－＇－Ｖ品‘＇？Ｉ指导教师陈化升研究员？？Ｉ？专业名務館塑‘研究方向棉巧遗传育种＇？二〇—五年六月答辩曰期，、■■．．■？ＩＤＥＮＴＩＦＩＣ乂ＴＩＯＮ乂ＮＤＣＨＲＯＭＯＳＯＭＡＬＬＯＧ乂ＴＩＯＮＯＦＡＮＥＸＯＧＥＮＯＵＳＢＴＧＥＮＥＩＮＵＰＬＡＮＤＣＯＴＴＯＮＢｙＡｎＢａ

2、ｉｗｅｉ乂ＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅＲｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｑＦｏｒ化ｅＭａｓｔｅｒ、ＤｅｇｒｅｅＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂｙｒｏｆ．ＣｈｅｎＸｕＳｈｅｎｐＰｇＣｏｍｐｌｅｔｅｄｉｎＭａｙ，２０１５Ｎａｎｉｎｇ，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａｊ原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进斤研巧工作所取得的成果，。除文中已经注明引用的内容外本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的

3、作品成果，。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已巧文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名：连另译的年屋月日１学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留，、使用学位论文的规定同意学校保留并向国家有关，允许论文被查阅和借阅部口或机构送交论文的复印件和电子版。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。。保密□，在本学位论文属于不保密口。年解密后适用本授权书＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作

4、者）：Ｍ年《月？日（需亲笔签名＾＾导师（需亲笔）签名：Ｗ年月日《＾目录目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ缩略词ｒｅｖｉａｔｉｏｎＶ（Ａｂｂ）一１第章文献综述１外源化抗虫基因的概论１Ｂｔ１１．１外源抗虫基因的来源及分类１２外源抗虫基因Ｂｔ的杀虫机理２．２外源化抗虫基因的应用２２．１在单化转基因抗虫植物中的应用３２．２在复合化转基因抗虫植物中的应用４２．３在Ｂｔ杀虫剂中的应用４３转Ｂｔ抗虫棉的生物安全性５３．１Ｂｔ基因向非转基因棉田的扩散５３．２化基因向棉花近缘植物的转移６３３Ｂｔ

5、杀虫蛋白对人类和动物的安全性影响６４分子标记技术的研巧进展７４．１分子标记技术的概论７４２．分子标记技术的应用７４记技术在棉花中的应用与研究进展．３分子标８５基因转化事件研究进展９６本研究的目的和意义９第二章陆地棉外源化抗虫基因的鉴定１１１实验材料与方法１１１．１实验材料１１１．２试验方法１１２结果与分析１４２．１选择标记鉴定１４１４２．２毒蛋白检测２．３外源抗虫基因的分子检测１６陆地棉一个外源化抗虫基因的湛定和染色体定位３Ｍｉｔ１８第Ｈ章陆地棉外源Ｂｔ抗虫基因的染色体定位巧

6、１材料与方法１９１．１实验材料１９１．２试验方法１９２结果与分析％２．１抗虫基因性状在海陆杂交群体中的分离规律２６．ｔ２２Ｂ抗虫基因的染色体定位２７３職３１３１．针对试验材料的选择性使用和方法简化３１．２Ｂ３外源ｔ基因的染色体定位３２．３３棉花外源基因插入热点及稳定性３２参考：献３３致谢４１＼＼摘要陆地棉一个外源Ｂｔ抗虫基因的鉴定和染色体定位摘要转化基因抗虫植物研究始于１９８７年，最初成功获得了转Ｂｔ烟草、番茄两种作物。由于其有效的杀虫抗虫效果而又对人和其它动物无毒性效应，从而受

7、到世界各国的普遍关注。ＤＮＡ分子标记比传统的形态学标记具有优势，主要体现在数量和共显性表达方面是一种理想的基因定位工具９９。本试验利用陆地棉抗虫的Ｎ０和非抗虫海岛棉亲，“’，本海７１２４为试验材料，通过鉴定该抗虫基因的具体种类，并对该基因进行了初步定位具体结果如下：，１、Ｂｔ基因特征的鉴定通过表型、化毒蛋白和ＤＮＡ互个层面对抗虫棉花的化基因进行了全面的鉴定分＇析，最终确定抗虫亲本Ｎ０９９中所含抗虫基因为双价Ｂ