荷斯坦奶牛妊娠早期和产后期血浆乳汁差异蛋白质组学研究

《荷斯坦奶牛妊娠早期和产后期血浆乳汁差异蛋白质组学研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学硕士学位论文荷斯坦奶牛妊娠早期和产后期血浆乳汁差异蛋白质组学研究DifferentialProteomicAnalysisofBloodPlasmaandMilkinEarlyPregnancyandDifferentPostpartumPeriodinHolsteinCows刘姗姗指导教师姓名赵兴绪教授(甘肃农业大学兰州730070)学科专业名称发育生物学研究方向蛋白质组学论文答辩日期2015年5月29日学位授予日期2015年6月答辩委员会主席柳纪省研究员评阅人吴润教授冯啸副教授2015年6月甘肃农业大学

2、2015届硕士学位论文摘要本研究采用二维凝胶电泳（2-DE）结合MADIL-TOF-TOF串联质谱法对荷斯坦奶牛妊娠早期血浆进行蛋白质组学分析鉴定，发现了6种差异蛋白在妊娠后表达量上调，分别是凝集素1前体、转甲状腺素蛋白前体、3,5-二碘水杨酸络合的牛血清白蛋白的晶体结构的A链、白蛋白、未命名蛋白产物及结合珠蛋白-25同源物1前体。凝集素1前体的表达量在发情及配种后呈现先升高后下降的趋势；转甲状腺素蛋白前体，白蛋白的表达量在发情及配种后呈先升高后下降再升高的趋势；3,5-二碘水杨酸络合的牛血清白蛋白的晶体结构的A链的表达量不断增加，未命名蛋白产物、结合

3、珠蛋白-25同源物1前体的含量是先升高后保持稳定。妊娠期这6种蛋白的含量均高于妊娠前，这些蛋白在妊娠早期血浆中可能与免疫应答、甲状腺激素转运、防止淀粉样纤维形成和碘的运输有关。采用相同方法对荷斯坦奶牛分娩后不同时期的血浆进行蛋白质组学分析鉴定，发现5种差异蛋白。结合珠蛋白前体、结合珠蛋白在分娩后表达量先升高后下降至与分娩当天相近。免疫球蛋白γ2链C区（克隆32.2）在分娩后表达量先下降再升高之后保持一个平稳的趋势。分娩后3,5-二碘水杨酸络合的牛血清白蛋白的晶体结构的A链和B链表达量低于妊娠后45天的含量且在分娩后表达量相对稳定。这5种蛋白可能分别与产

4、后应激、免疫应答和物质运输有关。采用二维凝胶电泳（2-DE）结合MADIL-TOF-TOF串联质谱法对荷斯坦奶牛妊娠早期乳汁进行蛋白质组学分析鉴定，发现5个差异蛋白点，分别是：3,5-二碘水杨酸络合的牛血清白蛋白的晶体结构的A链、免疫球蛋白γ1重链恒定区、免疫球蛋白G1重链恒定区、白蛋白、蛋白胨成分3。3,5-二碘水杨酸络合的牛血清白蛋白的晶体结构的A链在乳汁中含量的变化趋势为先降低再升高后降低。免疫球蛋白G1重链恒定区和免疫球蛋白γ1重链恒定区表达量显著降低，之后基本保持稳定的趋势。蛋白胨3的表达量虽有波动，但是妊娠早期高于发情当天。这些蛋白可能与物

5、质运输、免疫应答和抗菌有关。采用相同方法对荷斯坦奶牛分娩后不同时期乳汁进行蛋白质组学分析鉴定，发现8种差异蛋白，分别是：α-S2酪蛋白前体、β-酪蛋白、κ-酪蛋白前体、免疫球蛋白重链前体、白蛋白、血清白蛋白前体、cGMP磷酸二酯酶的α亚基、角蛋白I型细胞骨架10。α-S2酪蛋白前体只在分娩当天乳样中检测到，β-I甘肃农业大学2015届硕士学位论文酪蛋白在分娩后7天和分娩后35天检测到，且在分娩后35天的表达量比分娩后7天高，κ-酪蛋白前体在分娩当天表达量最高，之后表达量快速下降之后保持平稳。免疫球蛋白重链前体存在于分娩后7、15、28及35天的乳样中，

6、虽有波动，但在分娩后35天的乳样中表达量最低。血清白蛋白前体在分娩后7天到分娩后35天表达量表现出先升高后降低的趋势，白蛋白在分娩后7天到分娩后35天的表达量呈先降低后升高再降低的趋势，分娩后35天的表达量最低。cGMP磷酸二酯酶的α亚基在分娩后7、15及28天的表达量呈先上升后下降的趋势。角蛋白I型细胞骨架10在分娩当天到分娩后28天表达量的变化趋势平稳。这些蛋白可能与初乳的被动免疫、物质运输和产奶有关。关键词：荷斯坦奶牛；妊娠早期；产后期；血浆；乳汁；蛋白质组学II甘肃农业大学2015届硕士学位论文summaryProteomeanalysisin

7、plasmafromHolsteincowsinearlypregnancywereperformedusingtwo-dimensionalgelelectrophoresis(2-DE)methodcombinedwithMADIL-TOF-TOFtandemmassspectrometry.Sixproteinswereup-regulatedafterbreeding,whichincludingTPA:conglutinin1precursor,transthyretinprecursor,ChainA,CrystalStructureOfB

8、ovineSerumAlbuminInComplexWith3,5-Diiodosalicyl