胡杨na~+h~+反向转运体pemx3转化拟南芥研究

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1、分类号：密级：鴻Ｗ／、掌研究生学位论文＋＋论文题目（中文）胡杨Ｎａ／Ｈ反向转运体戶＾化巧转化掛南芥研究＋＋Ｔｒａｎｓ化ｒｍａｔｉｏｎｏｆ化ｅＮａ／ＨＡｎｔｉｐｏｒｔｅｒ戶ｅｉＶ化巧论文题目（外文）台ｏｍＰｏｐｕｌｕｓｅｕｐｈｒａｔｉｃ幻ｉｎｔｏＡｒａｂｉｄｏｐｉｓｉｓ研究生姓名刘亚芬学科．、专业生物学植物学研究方向植物分子生物学学位级别硕：ｔ导师姓名、职称邱全胜教授论文王作起止年月２０１２年９月至２０１５年４月论文提交日期２０１５年４月论文答辩日期２０１５年５月学位授予日期校址：甘

2、肃省兰州市原创性声明：本人郑重声明本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研充所取得的成果，。学位论文中凡引用他人己经发表或未发表的成果、数据、观点等均已明确注明出处，。除文中己经注明引用的内容外不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果，。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体均己在文中Ｗ明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。飞．论文作者签名；日期：＞心心／关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向国家

3、，允许论文被查阅和借阅有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版；本人授权Ｌ兰州大学可乂陪本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该一论文直接相关的学术论文或成果时，第署名单位仍然为兰州大学。本学位论文研究内容：□可Ｗ公开□不宜公开，，己在学位办公室办理保密申请解密后适用本授权书。一＂Ｖ＂（请在Ｗ上选项内选择其中项打扛鮮论文作者签名：导师签名：气ク＇レ－＾パ勺日期．：ｉｌｈ日期：＋＋胡杨Ｎａ／Ｈ反向转运体化ＡＴ／Ｘ？转化拟南芥研究中文摘要ｅＭ一胡

4、杨ｐ／ｉｒａ＂ｃ￡（是我国西北干早盐碱荒漠地带唯能形成森林的高大乔木树种，）具有极强的耐盐碱和抗干早能力。所Ｗ，揭示胡杨的抗逆机制，是培育耐盐作物新品种的崭新的育种途径。＋＋＋＋研究表明，Ｎａ，Ｋ／ｒｒ反向转运体在植物细胞Ｎａ／Ｋ运输及植物的耐盐性方面起着重＋＋＋要作用。我们实验室采用薛母生长实验发现，胡杨Ｎａ７Ｈ反向转运体ＰｅＮＨＸＢ具有Ｎａ，Ｋ＋一－和Ｌｉ的转运活力。我们进步采用结构域拼接技术（ｄｏｍａｉｎｓｗｉｔｃｈ）发现，ＰｅＮＨＸ３的ＴＭ１１结构域调控着Ｌ／的转运活力。我们采用基因克隆，转基因植株构建和结构域拼接等分子生物学技术手段，分析胡杨、

5、亚细胞定位和耐盐胁迫机理３ＰｅＮＨＸ３的离子转运特性，期阐明胡杨ＰｅＮＨＸ在离子转运和逆境胁迫方面的生物学功能。本研巧取得的研究结果如下：－、１．采用基因克隆、载体构建Ｗ及农杆菌浸染等方法，将ｆｅＡ用Ｘ？基因转入拟南芥Ｃｏｌ０化ｆｃｃ／突变体和突变体植株，获得转基因植株。２．利用烟草瞬时表达体系分析ＰｅＮＨＸＢ的亚细胞定位，发现ＰｅＮＨＸ３主要定位于液胞膜上。３ＨＸ－．对转基因植株耐盐性分析发现ＰｅＮ３ｏｌ０，，能够提高Ｃ的耐盐性恢复突变体对ＮａＣｌ的耐受性，但不能恢复植株对ＮａＣｌ的耐受性，表明ＰｅＮＨＸ３的作用可＋＋能是将Ｎａ转移到液胞内，降低胞

6、质中Ｎａ含量。渗透胁迫分析发现，ＰｅＮＨＸ３能够增＋强突变体对甘露醇渗透胁迫的耐受性ｉ，ＰｅＮＨＸ。Ｌ运输活性分析发现３能够提＋＋－Ｌ／Ｃｏｌ０ＩＷｃ；ｉＰｅＮＨＸ高的耐ｉ胁迫能力，增强ｆｃ突变体对Ｌ的耐受性，表明３具有较强＋的Ｌｉ转运活力。４一ＴＭＨＬ广．为了进步验证结构域在植物体内调控转运活为的作用，我们将两个拼接基因如Ｗｉ打－户Ｗ册］－０９９和財》－Ｃ５Ｊ７转入拟南芥Ｃｏｌ－０和屈做７突变体盐胁迫能力，Ｔ２。植株，分析离子转运特性和耐。目前代转基因植株正在生长之中＋ＮａｉＰｅＮＨＸ３关键词：胡杨，／ｒ反向转运体，，离子转运，耐盐胁迫Ｉ＋＋＊Ｔｒ

7、ａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＮａ／ＨＡｎｔｉｏｉｔｅｒ戶ｅＡＴ／拟ｆｒｏｍｐＰｏｐｕｌｕｓｅｕｐｈｒａｔｉｃａｉｎｔｏＡｒａｂｉｄｏｐｉｓｉｓＡｂｓｔｒａｃｔＰｏｐｗ／ｗ＊？ｅ卿片ｉｓａｔｒｅｅｈａｌｏｈｔｅ化ａｔｅｘｉｓｔｓｉｎｓａｌｉｎｅｄｅｓｅｒｔａｒｅａｓｉｎｎｏｒｔｈｗｅｓｔＣｈｉｎａ．户．ｐｙｈｕｈｏｗ．幻ｉｓｈｉｇｈｌｙｔｏｌｅｒａｎｔｔｏｓａｌｔａｎｄｄ