空泡形成毒素的生物学特性分析及078血清型禽大肠杆菌病疫苗的研制

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2、．秦－Ａ，．＇．一％Ｗ巧－尹知气？爱．＊’９＇＂。蘿＇指导教师姓名：刘宗平教授，扬州大学，江苏扬州，２２５００９－一、于圣青研究员，中国农业科学院，上海，２０１１００三＿、＾３＇申请学位级别：硕壬学科专业名称：临床兽医学＾读＇论文提交日期：２０１５年４月论文答辩２０１５年６月日期！——＊－—■■心学位授予单位！扬州大学学位授予日期：２０１５年６月■答辩委员会主席？苗：流．．義Ｉ＇共；＾？＇户＾＊．—．Ｖ方．义

3、，本．．—＇、‘Ｓ在．＇－心．攝八＇汝．，－＇＂＂、：—传．超＊火…苗逆梦軒、—．；．．Ｖ＊Ｃ一．’＇一Ｉ、．‘Ｖ－＂■－？二爲、＇．／；一＇－。６二、２０１５年巧争巧、，―＇？，＾；八．户；方：：，决诚．．、；ｒ巧推知味兴券＾吟斋．心有空泡形成毒素的生物学特性分析及０７８血清型禽大肠杆菌病疫苗的研制Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｖａｃｕｏｌｅｆｏｒｍａｔｉｏｎｔ；ｏｘｉｎｉｎａｖｉａｎｐａｔｈｏｇ

4、ｅｎｉｃＥ．ｃｏｌｉａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｏｉｌｅｍｕｌｓｉｏｎｖａｃｃｉｎｅｏｆ０７８ｓｅｒｏｔｙｐｅａｖｉａｎａｔｈｏｅｎｉｃＥ．ｃｏｌｉｐｇ研究生：赵益超学科：临床兽医学导ｉＵｐ：刘宗平教授于圣青硏究员扬州大学兽医学院２０巧年６月赵益超空泡形成毒素的生物学特件分析及０７８血清型禽大豚杆巧病疫苗的研制［中文摘要禽致病性大肠杆菌（Ａｖｉａｎｐａ也ｏｇｅｎｉｃ￡．ｃｏ扣ＡＰＥＣ）可＾＾导致鸡、火鸡及其他禽类发、包炎－生肠道外疾病

5、，如屯、肝周炎、脑膜炎等，甚至引起败血症从而急性死亡。７３０日龄〇￣。，成年家禽亦可发病该病发病率高（３．８／（＾４２．６％）、死亡率高（４０％６０％）维禽易感；极（９０．３％）少数恶劣的环境可导致极高的死亡率，我国禽类养殖业饱受其害。最近有研巧表。明，ＡＰＥＣ亦可引起人类及哺乳动物发病，甚至死亡目前多数养殖厂主要通过添加大量抗生素防控该病，然而由于半个多世纪广泛应用抗生素，ＡＰＥＣ已经演化出多种血清型的。耐药性菌株，这使得我们承受着巨大的压为本研究根据ＮＣＢＩ公布的序列，分别设计了１８对

6、、１４对引物用ｌｉｌ检测毒力基因及耐、生、药基因的分布情况；同时对菌株的药物敏感性物被膜形成能力致病性及血清型分布进行检测。毒力基因检测结果显示，分离株的ｙ？ｗＣ、ｗａｆ、Ａｅ及、ｙ曲及ＣＷＪ护４五种毒力基因的检出率分别为％％、９６％、９６％、９０％、９０％为ＡＰＥＣ的保守性基因，＾／和７？（：检；巧出率仅为３２％和１０％。耐药基因检测结果显示，氨基糖昔类、横胺类、哇诺丽类、四环素类抗生素的抗性基因Ｓ化４、Ｗ公、娜Ｗ、《＜／／／及公獻（：检出率分别为９８％、９８％、１００％、－９８％及１００

7、％公ｏｍ／、ｏｍ５及检出率分别为０％、０％，内酷胺类抗性基因及４％。、药敏试验结果显示，所有ＡＰＥＣ对四环素克林霉素及利福平抗生素１００％耐受，对头抱１６％，３４％菌素类的菌必治耐药性最低仅为对醜胺类的氯霉素耐受率其次为；大环内醋类的红霉素及阿奇霉素耐药率分别为９０％、８２％，哇若丽类的氣曠酸抗生素耐药率为８２％，头抱菌素类的头抱嗟分耐药率为８４％。ＡＰＥＣ分离株的多重耐药比较严重，６６％分离株同时耐受１０种抗生素，４％ＡＰＥＣ分离株耐受本次检测的所有类型抗生素，表明ＡＰＥＣ广泛耐药且存在

8、交叉耐药现象。生物被膜形成能力检测结果显示，ＡＰＥＣ分离株的生物被膜形成能力均较弱。血清型分型结果显示，０７８血清型为主要血清型，该群对１０日龄輕桃谷鸭致病性差异较大；ＡＰＥＣ的致病机理在于ＡＰＥＣ首先利用熟附相关因子与宿主细胞表面特异性受体结合从而定殖于特定宿主细胞表面，然后通过侵袭相关毒为因子侵袭宿主细胞，继而进入血液循环系统扩散至各