rapd技术在甘肃桃遗传多样性与种质资源分析中的应用

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1、RAPD技术在}十肃桃遗传多样性与种质资源分析中的应用展最为迅速的一类遗传标记。现已有许多成功的技术出现，并在植物遗传育种领域得到广泛应用。RAPD技术自1999年建立以来，以其快速、准确、灵敏度高的特点，一开始就受到广泛的重视，在分类研究、品种鉴定、系谱分析、遗传图谱构建、基因标记等方面得到广泛的应用“‘“。““”’“，证实了其应用的价值和有效性。本研究旨在对甘肃桃主要栽培品种调查的基础上，探索RAPD标记技术在桃品种鉴定上的应用，利用这一技术分析桃种质基因组的遗传多样性，研究甘肃桃的种类、分

2、布和特点，为遏制伪劣苗木，建立桃良种繁育体系，进行桃种植的科学区划，发展地方特色产业提供有益的理论与技术参考。第x页共72页RAPD技术在甘肃桃遗传多样性与种质资源分析中的应用缩略词Abbrieviation第vI页共72页第一章文献综述1．1引言桃，别名仙桃、寿桃、寿果，是当今世界人民普遍喜爱的水果之一，也是我国古老的果树之一。它栽培历史悠久，分布十分广泛，在长期的自然选择和栽培实践中，形成了适合各地气候条件的种质类型，具有丰富的遗传多样性。这是桃果业持续发展的重要保证。粗略统计我国桃品种有2

3、000个左右，约占全世界的27％。桃的果实色艳味美，芳香可口，营养丰富，果肉或柔软多汁，或甜脆爽口，深受人们喜爱。近十年来，桃的生产发展更加迅速，面积和产量大幅度增加。适应生产发展的需要，世界各地加强了桃种质资源的收集整理、保存和挖掘利用工作。我国也不例外，在桃种质资源方面，先后在中国农科院郑州果树研究所，北京市林果研究所和江苏省园艺研究所建立了三个桃种质资源圃。已积累了桃农艺性状、形态性状、生物学特性、品质、抗逆性等种质评价信息资料，取得了丰硕的研究成果。另外，各地桃传统产区在地方品种资源的收

4、集整理及繁育方面也做了大量工作。但同时不容忽视的是，随着地区间资源的频繁交流，加之管理上的不足．许多品种资源存在背景不清，名称混乱的现象，特别是苗木市场中以假乱真，以劣充优现象严重。这对今后的生产科研都是不利的，同时也限制着桃种质的充分利用。从管理的角度，解决上述问题的关键在于建立一种新的稳定可行的果树品种资源鉴定技术。随着现代分子生物学的建立与发展，品种资源研究技术也从形态指标、生化指标发展到DNA分子指标的阶段。传统的种质研究方法是形态特征研究法。该方法简单、直观，但周期长，易受环境影响，品

5、种数量较多的情况下，鉴定精度低。本世纪中叶，随着电泳技术的发展，蛋白质(如同工酶)指纹出现，把种质资源研究技术提高到了一个新的水平，被认为是种质资源研究的强有力工具。蛋白质指纹图谱反应了不同品种蛋白质编码基因位点上的等位基因间的差异，该法个体特异性强，鉴定精度也较高，因而得到了广泛的应用。近十几年来，随着分子标记技术的不断发展和完善，DNA指纹图谱应运而生。其中主要有：RFLP、RAPD、SSR、AFLP等，其中RFLP指纹密度低，需要探针。SSR需要以目的基因组的DNA序列信息为基础，因而作为

6、DNA指纹技术的应用受到一定程度的限制。AFLP需要酶切，同时要制作接头，较为复杂。RAPD简单、快捷、自动化程度高而被广泛应用。分子标记以其独特的优点，在许多方面有着广泛的应用，尤其在种质资源研究上，也显示了广阔的应用前景。它包括生产上应用的优良果树品种、砧木，有重要应用价第1甄共72页RAPD技术在叶肃桃遗传多样性与种质资源分析中的应用值的野生资源，育种中的优良单株，原生质体融合材料，体细胞杂交种，嵌和突变体，株心苗，组培繁殖材料以及具有某些特殊抗性(如抗病、抗虫、耐盐碱、耐缺素)材料等。迅

7、速发展的分子标记还为果树品种亲缘关系研究提供了有力的手段，比传统的方法更能反映品种的遗传多样性。可在分子水平上去揭示果树植物系统演化及分类情况，为果树种质的亲缘演化、分类、种质保存提供有力的依据，能更加有效的保护、利用果树种质资源。1．2桃种质资源1．2．1桃种质资源概况及起源桃是中国最古老的果树之一，栽培历史达4000年以上，分布广泛，在长期自然选择和生产实践中，逐渐形成了不同类群和各地特色品种，据相关资料统计我国桃品种有2000个左右，约占全世界的27％。桃属蔷薇科(Rosaceae)，李属

8、(厅M淞￡)，我国栽培和野生的有以下五种：(一)普通桃(Prunuspersica以)．Batsch)又名毛桃，在全国各地广泛栽培，它包括了所有桃的栽培品种，类型很多。其中作为栽培、砧木和观赏用的还有以下5个变种。1．油桃(尸persicaL．VEi，．nectarinaMaxim．)果皮光滑无毛。2．蟠桃(尸persicaL．vat,compressaBean)果实扁平，核小。3．寿星桃(Ppersica厶眦debsaMakinD)树型矮小，枝条节间短。4．垂枝桃(PpersicaL．vat．