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时间:2019-03-12
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1、天津大学硕士学位论文磁场对固定化酶的活性及稳定性的影响姓名:王志斌申请学位级别:硕士专业:化学工程指导教师:贾绍义20080501摘要为了探究磁场对固定化酶的影响,本文选取固定化a一淀粉酶和固定化过氧化氢酶为研究对象,首先对这两种酶进行了固定化,得出了它们的最佳固定化条件:对a.淀粉酶固定化后发现,最佳加酶量为每15mL壳聚糖溶液中加入3mL酶液(1mg/mL),交联剂用量为loomL,交联时间0.5小时;对过氧化氢酶固定化后发现,最佳加酶量为每15mL壳聚糖溶液中加入2mL酶液(O.4m∥mL),
2、交联剂用量和交联时间与a.淀粉酶相同。然后在不同磁场强度的永磁场中,进行一定时间的磁化处理,从固定化酶的活性、酶促反应动力学和操作稳定性等几方面进行考察。研究结果表明,外加磁场对不同的固定化酶会产生不同的影响:对于固定化a.淀粉酶,磁化后酶的活性明显增加,且随磁场强度增大活性增加逐渐减小,同时,固定化伐.淀粉酶的‰变小,pH稳定性增强,保存时间延长;而对于固定化过氧化氢酶,磁化后酶的活性也增大,但是和固定化o【.淀粉酶不同的是,磁场强度越大,活性增加越明显。同样,固定化过氧化氢酶的‰减小,pH稳定性
3、增强,保存时间延长。此外,磁场对某个固定化酶的影响并不是呈简单的线性关系。本文分别对不同磁场强度下酶促反应动力学的实验数据进行了拟合,得到了两种固定化酶的米氏常数‰,并对拟合结果进行了检验。本文针对所研究的物系,从磁学基本理论及磁化机理分析入手,讨论了磁场对固定化酶的结构的影响,并对磁场影响固定化酶的机理进行了探讨。认为磁场主要是通过影响酶和载体的结构,从而影响固定化酶酶促反应,并以此为依据,对实验现象进行了解释。关键词:磁场;固定化a.淀粉酶;固定化过氧化氢酶;酶促反应ABSTRACTInthes
4、tudy,inordertofindmeinfluenceofthemaglleticfieldonimmobilizedem珂me,a-amylaseandca_talase、Ⅳereimmobilized.Forthea.amylase,theoptimumimmobilizationconditionsoftheemⅣmewerefollows:theamountofemwmewas3mLsolutionofenzyme(1mg/mL)perl5mLsolutionofchitosan,the
5、amountofcmss-lim(reagentwas100mLandthecross.1inktimewas0.5h.Fortheca:talase,theoptimumimmobilizationconditionsoftheenzymewerefollows:theamountofem拶mewas2mLsolutionofenzyme(0.4m咖L)per15mLsolutionofchitosan,the锄ountofcross—linkreagentandthecross.1inktime
6、werethesamewitha.amylase.Thenthenal=uresofimmobilizeda,-amvlaseaJldimmobilizedcatalasewerediscussedunderthevariousintensi西曲aticmagneticfieldwhichwereO.15T'0.30TandO.45Twiththecontr01.Theimmobilizedenzymeswereputinthemagneticfieldforsometimeandthentheir
7、activities,enzymaticreactionsandoperatedstabilitieswereinvestigated.Theresultsshowedthatthemagneticfieldwouldhavedin’erente何’ectsonthedi绦}rentimmobilizedenzyme.Fortheimmobilizeda.amvlase,theactivitywasobViousIyimpr0Vedbythemagneticfield,锄dthela唱erthein
8、tensityofmagneticfieId、Vas,theIessVisibletheimprovementofactivi够Iooked,meanwhile,thevalueof.K.mwasdecreased,andthestabilitiesunderdi行.erentvalueofpHandthetimeofpreseⅣationwereallenhanced.Forimmobilizedcatalase,theactiVi钾、vasobViouslyimp
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