探究pH对酶活性的影响

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1、探究pH对酶活性的影响摘要：酶的活性受环境条件的影响，尤其是对温度及pH的变化非常敏感，表现有最适温度和最适pH的现象。在最适温度及最适pH的环境中，酶的活性最强，酶促反应速度最高；低于或高于最适温度和最适pH,酶活性变弱，酶促反应速度降低。除温度及pH夕卜，某些化学物质可抑制或促进酶的活性。可抑制酶活性的化学物质，称为酶的抑制剂，可促进酶活性的化学物质，称为酶的激活剂。环境pH直接影响到酶和底物的解离状态，从而影响到酶与底物的结合和反应速度。在某一定pH时，酶活性大最大值，这一pH成为酶的最适pH。环境p

2、H高于或低于最适pH时,酶的活性降低，远离最适pH时，甚至会导致酶的变性失活。不同的酶最适pH不尽相同。酶的最适pH不是一个特征性的物理常数，对于一个酶，其最适pH因缓冲液和底物的性质不同而有差异。关键词：pH；酶活性；生物学测定酶的最适pH值，是进一步了解酶生物学的基础。本实验以唾液淀粉酶为材料来观察酶活性受pH影响的情况。唾液中含有唾液淀粉酶。淀粉在该酶的催化作用下会随着时间的延长而出现不同程度的水解,从而得到各种糊精乃至麦芽糖、少量葡萄糖等水解产物。而碘液能指示淀粉的水解程度一一淀粉（蓝色），紫色糊精

3、（紫色），红色糊精（红色）、麦芽糖及少量葡萄糖（黄色），通过观察淀粉水解程度从而间接的测出唾液淀粉酶的最适pH值。结果测得pH在6.81左右水解最彻底,故唾液淀粉酶的最适pH值在6.81左右。一、材料与方法（一）器材和试剂1•器材试管及试管架、烧杯、恒温水浴箱、冰块、白瓷板2.试剂（1）0.5%淀粉溶液：称取0.5g可溶性淀粉，加少量预冷的蒸憾水，在研钵中调成糊状，再徐徐倒入约90ml沸水，同时不断搅拌，最后加水定容为100ml即成。要求新鲜配制。（2）不同pH值缓冲液的配置：取8个50毫升锥形瓶，编号。按

4、下表中的比例,用吸量管添加0.2M磷酸氢二钠溶液和0.IM柠檬酸溶液，制备pH5.0—8.0的8种缓冲溶液。（3）碘-碘化钾溶液：碘化钾3g；蒸憾水100ml；碘lgo先将碘化钾溶于蒸憾水中，待全部溶解后再加碘,振荡溶解。将此液保存在棕色玻璃瓶内。（4）唾液的获取用蒸憾水漱口，然后用舌尖抵住下频，微微低头,将下嘴唇搁在烧杯边缘，让唾液自然流入烧杯中（二）实验过程取8支干燥的试管，编号。每支试管加入已获取的唾液2mlo将8个锥形瓶中不同pH的缓冲液各取3毫升，分别加入相应（I一8号）的试管中。混匀后，同时置于

5、37〜38°C水浴中保温。约lmin后，再向每个试管中添加0.5%淀粉溶液lml,混匀。由8支试管中各取出1滴置白瓷板上，加一滴碘-碘化钾溶液检验淀粉的水解度，观察各管呈现的颜色。判断在不同pH值下淀粉被水解的程度，可以看出pH对唾液淀粉酶活性的影响，并确定其最适pH。（三）实验结果二、实验分析由结果可得：当pH值为6.8时，唾液淀粉酶活性最强，所以唾液淀粉酶的最适pH值为6.8左右。当pH值过小或过大时，酶的活性就会受到抑制，所以从某种意义上说pH值过高或过低这个因素是唾液淀粉酶的抑制剂。参考文献：[1]

6、许冰，原媛《pH值对酶活性影响的实验观察《临床合理用药》.20103（10）