产氢菌的筛选及培养优化的研究

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1、西北大学硕士学位论文产氢菌的筛选及培养优化的研究姓名：赵小尊申请学位级别：硕士专业：化学工程指导教师：范代娣20091001西北大学硕士学位论文摘要在2l世纪，清洁的氢能是最有发展前景的替代能源之一。当前，氢气的开发和利用已成为科学研究的重点课题之一。生物制氢技术因其具有清洁、节能和不消耗矿石资源等突出优点而备受人们关注。本论文定位于产氢茵的筛选及培养优化的研究。实验挑选了5种来源不同的污泥样品，对其进行厌氧梯度驯化，分析比较了不同样品产氢能力的差别。其中来源于深层河底的污泥样品产氢能力达1．5toolnJ(molglucose)。同时从上述产氢能力高的污泥样品中筛选出了5株产氢

2、能力较好的菌种，以CHl的产氢能力最高。对该菌株进行了形态观察和一些基本的生理生化试验，初步确定菌株的特性为：革兰氏染色阴性，无荚膜、芽孢，穿刺培养后，菌落长如根状，判断该菌运动性较强，估计有鞭毛。葡萄糖发酵试验为双阳性(产气并产酸)；甲基红试验为阳性；V．P．试验阳性；吲哚试验阴性；产H2S；具有还原硝酸盐的能力。又通过扫描电镜观察，该菌为杆状，菌体大小约1．5～2．511m牢o．5pm。并进一步通过16SrDNA序列分析。初步鉴定该菌为产气肠杆菌。对该菌进行生长特性研究表明：CHl的产氢过程是和其生长过程密切相关，氢气是其生长伴随型代谢产物。该菌种的最佳培养温度是35℃，最适

3、的pH值为6。最适的碳源是葡萄糖，最佳的氮源是蛋白胨、酵母粉和牛肉膏。同时CHl发酵周期很短，只有12h。关键词：生物制氢；分离鉴定；产气肠杆菌。西北大学硕士学位论文AbstractInthe21century,cleanhydrogenenergyisoneofthemostperspectivereplaceableenergyre咖ceS．Thedevelopmentandutilizationofhydrogenisbecomingoneofthemostimportantissuesinscientificresearches．Biologicalhydrogen,on

4、eofhydrogenproductions，hasattractedwidespreadattentionsforitsclean,economicandnotconsuminganyfossilfuels．Inthispaper,fivedifferentsledgesarechosenforanaerobicgradientacclimatization．Thesample(3)谢mthehighestbiohydrogenproductioncapacityandtheflocculationratio，whichis1．5molH2／(molglucose)；atthe

5、sametime，fivestrains诵thhigherefficiencyareobtainedamongthosesledges，especiallyCH1，whichisthebestofa11．Itwasinitiativeidentificationbymorphologicalandbiochemicalanalysis：BacteriaGramstain—negative，non-Clostridiumperfringens，Bacillus，punctureculturedlong雒theroot-likecolony,judgethemovementofmor

6、ebacteria,itisestimatedthatflagellin．Glucosefermentationtestforthedouble-positive(andacidgas)；methylredtestWaspositive；VPtestpositive；Indoletestnegative；producingI-12S．Italsohastheabilitytorestorenitrate．Byscanningelectronmicroscopy,thestrainWastherod-shar)edbacteria、j~riⅡlthesizeofabout1．5～2

7、．5pm幸0．5lIm．AndthestrainWasdeterminedasEnterobacteraerogenesthroughthesequenceanalysis16sRNAPreliminaryidentification．Fromtheresearchofthebacterium，wecanknowthat：thehydrogenproductionwasassociatedwiththegrowthofthebacterium,whichWasaaccompany