氨基胍治疗前后糖尿病大鼠视网膜aqp-4表达变化及其和ages相关性的研究

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1、万方数据目录一、中文摘要…………………………………………………………………..01二、英文摘要…………………………………………………………………..03三、前言……………………………………………………………………06四、材料和方法………………………………………………………………...11五、结果……………………………………………………………………18六、讨论……………………………………………………………………28七、结论……………………………………………………………………38八、参考文献…………………………………………………………………...39九、致谢……………………………………

2、……………………………....45十、综述…………………………………………………………………........46万方数据中英文缩略词表英文缩写英文全称中文对照DMDiabetesMellitus糖尿病DRDiabeticRetinopathy糖尿病视网膜病变SDratSprague-DawleyratSD大鼠STZStreptozotocin链脲菌素AGAminoguanidine氨基胍BRBBlood-retinaBarrier血-视网膜屏障AGEsAdvancedGlycationEndProducts糖基化终末产物AQPAquaporin水通道蛋白MIPMajorIntrin

3、sicProtein主要内源性蛋白PKCProteinKinaseC蛋白激酶CPKAProteinKinaseA蛋白激酶AACAdenylateCyclase腺苷酸环化酶cAMPCyclicAdenosineMonophosphate环腺苷酸ELISAEnzymelinkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附测定ROSreactiveosygenspecies活性氧族NSNormalSaline生理盐水万方数据氨基胍治疗前后糖尿病大鼠视网膜AQP-4表达变化及其与AGEs的相关性研究中文摘要目的：通过观察糖尿病(diabetesmellitus，DM)大鼠视网膜组织中

4、水通道蛋白（aquaporin，AQP）-4表达改变，探讨糖尿病视网膜病(diabeticretinopathy,DR)是否与体液代谢异常有关；通过氨基胍（aminoguanidine，AG）治疗前后，D大鼠视网膜AQP-4表达变化与糖基化终末产物（advancedglycationendproducts，AGEs）表达变化的相关性分析，探讨AQP-4表达改变是否与AGEs异常有关。方法：选择清洁级2月龄雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（200g左右）51只，随机分成正常对照组、糖尿病组和糖尿病AG治疗组3组。一次性腹腔注射链脲菌素（streptozotocin,STZ

5、）诱发糖尿病模型，正常对照组腹腔注射生理盐水，糖尿病AG治疗组在糖尿病动物模型建立成功后对其进行灌胃给予AG治疗，各组分别于第1个月、3个月和6个月取材动物视网膜组织。应用HE染色方法观察正常组大鼠和糖尿病大鼠视网膜组织的病理改变；应用免疫组织化学染色和WesternBlot等方法观测各组大鼠视网膜组织AQP-4的表达与变化；应用ELISA方法观测各组大鼠视网膜组织AGEs的表达与变化，并分析AQP-4表达改变与AGEs的相关性。应用计算机图像分析实验结果，并结合SPSS17.0软件包进行统计分析，实验数据以x±s表示。均数间的比较主要采用t检验、重复测量资料的多变量分析、方差分

6、析和线性相关分析等。α=0.05为显著性检验标准。结果:正常对照组的大鼠随着饲养时间的延长体质量呈上升趋势，血糖值维持在正常水平（＜5.7mmol/L）；成功建立糖尿病模型的大鼠体质量在12h后开始有明显的下降，血糖值在72h后均达到DR模型的标准（＞17.6mmol/L），且随着DR病程的发展血糖值都维持在较高水平，与正常对照组大鼠相比有显著性差异（P＜0.05）；糖尿病AG治疗组大鼠的体质量和血糖值与糖尿病组大鼠相比无显著性差异（P＞0.05）。糖尿病1个月大鼠视网膜各层结构清晰，各种细胞见明显形态结构改变；糖尿病3个月大鼠视网膜外网层、内网层和节细胞层结构疏松；糖尿病6个月大

7、鼠视网膜各层水肿更明显，病变主要在外网层及内网层，节细胞层见空泡化改变，1万方数据内核层见较多空泡。在正常对照组、糖尿病组和糖尿病AG治疗组大鼠的视网膜组织中均可见AGEs与AQP-4的表达，与正常对照组大鼠相比，糖尿病组大鼠视网膜组织中，AGEs和AQP-4的表达均高于正常对照组，且随着病程的延长而增加，在1个月、3个月和6个月时均有显著性差异（P＜0.05）；糖尿病AG治疗组大鼠血清和视网膜组织中AGEs表达下调，与糖尿病组大鼠血清和视网膜组织中AGEs的表达相比