烟草灰霉病复合生防细菌的筛选及其防治效果测定

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1、分类号●UDC$435．111．42学学校代码10593学号1031304002密级丛盈彦商犬学位论文烟草灰霉病复合生防细菌的筛选及其防治效果测定陈永珍专业名称植物病理学学院名称农学院指导教师袁高庆(副教授)申请学位级别硕士论文提交日期2013年4月论文答辩日期2013年5月学位授予日期2013年6月答辩委员会主席韦继光教授论文评阅人双盲评阅论文评阅人双盲评阅广西大学学位论文原创性和使用授权声明LIYIIIIIl2lJlIIl4IIIllolllll8llllll6llllll7lllll掣本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独

2、立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复

3、制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。团不保密。(请在以上相应方框内打“√”)论文作者签名：争辱拂日期：沙l3年镧如日指导教师签名／籁撼次日期：如f；辱6闰伽因作者联系电话：肛277／a6斗二电子邮箱：从踟∥厅扩@形3．坝烟草灰霉病复合生防细菌的筛选及其防治效果测定摘要烟草灰霉病是近年来广西烟草病害调查中当地新发现的病害。目前农业生产上防治灰霉病主要依靠化学药剂，而化学药剂容易造成病菌产生耐药性、环境污染等问题。随着越来越多的拮抗微生物陆续被发现，利用微生物防治烟草灰霉病具有广阔的发展前景。本研究在对烟

4、草灰霉病菌内生拮抗细菌筛选的基础上，构建复合微生物并测定其对烟草灰霉病的防治效果，另对拮抗细菌的生防机制进行探讨，获得的研究结果如下：l、采用菌丝生长速率法从470株烟草内生细菌中获得对烟草灰霉病菌有拮抗作用的菌株70株，对该病菌有营养竞争作用的菌株32株；另以孢子萌发法获得对病菌孢子萌发抑制率较高的菌株72株；从中选择抑菌效果较好的27株生防菌，采取烟叶组织法进行复筛，有12株菌株的防治效果超过50％。对其中7株进行生防菌之间亲和性的测试，除菌株Y98外，其他菌株之间均表现亲和。2、根据生防菌株之间的亲和性及抑菌效果，选择5株生防菌

5、株，结合其形态特征、生理生化性状、16SrDNA和KvrB基因序列分析，将菌株G59、G81和Y11鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliqruefaciens)，菌株Y88和Y141属于假单胞菌属(Pseudomonas)产荧光假单胞菌类群。3、对以上5株生防菌进行组合，有两株菌株组合、三株菌株组合和四株菌株组合3种不同的组合方式。在所有生防菌组合中，Yll+Y141菌株组合的防治效果最高为72．02％，Yll+Y88+Y141+G59菌株组合的防治效果最差，为42．41％。为了提高Y1l+Y141菌株组合的防治效果，

6、对它们的混配比例进行优化。试验结果显示，比例为2：1的防治效果比各单菌株以及其他混配比例处理的防治效果都高，为75．68％。4、选择Yll：Y141(2：1)的组合进行温室盆栽试验防治效果测定。从试验结果看，各处理的保护效果均比治疗效果高。Yll+Y141(2：1)、Yll、Y141和300mg／L的异菌脲各处理的保护效果分别为65．81％、57．91％、42．09％和94．66％；其治疗效果分别为59．51％、42．19％、34．50％和85．78％，复合菌株的防治效果高于单菌株。5、Yll和Y141两株生防菌的胞外代谢产物对供试的

7、12种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用，抑菌谱较广。它们的胞外代谢产物对烟草灰霉病菌菌丝生长的抑制作用要强于挥发性代谢产物。通过光学显微镜观察，Yll和Y141两株生防菌的胞外代谢产物均能使灰霉病病菌菌丝形态发生显著变化，菌丝粗短畸形，部分原生质渗漏，细胞壁出现褶皱。关键词：烟草灰霉病；灰葡萄孢：拮抗细菌；复合微生物；防治效果IIScreeningandControlEfficiencyofComplexBacteriaStrainsAgainstTobaccoGreyMouldChenYongzhen(CollegeofAgric

8、ulture，GuangxiUniversity,Nanning530004，China)AbstractIntherecentyears，tobaccograymoldisanewdiseaseduringthesur