FOXP3增强子甲基化与复发性自然流产之间关系的研究

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1、单位代码10475申请编号10475201400263分类号R322硕士学位论文(同等学力)FOXP3增强子甲基化与复发性自然流产之间关系的研究学科、专业:人体解剖与组织胚胎学研究方向:妇产科申请学位类别:医学硕士申请人:李代红指导教师:王军副教授二〇一七年六月STUDYONTHECORRELATIONBETWEENENHANSERMETHYOFFOXP3ANDRECURRENTSPONTANEOUSADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUni

2、versityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByLiDaihongSupervisor:Prof.WangJunJune,2017摘要目的本研究通过检测正常早孕妇女以及复发性自然流产患者蜕膜组织FOXP3表达水平,以及FOXP3增强子甲基化水平,分析两者之间的关系,以阐明URSA的发病原因及其发病机制。方法患者知情同意后,负压吸引出绒毛及蜕膜,利用绒毛组织培养及染色体核型分析方法检测绒毛染色体,根据

3、绒毛染色体检测结果以及所有纳入对象临床资料,将其分为三组:绒毛染色体正常的复发性流产组即URSA组(共56例)、绒毛染色体异常的复发性自然流产组即对照组1(共24例)和绒毛染色体正常的正常早孕组即对照组2(共39例)。利用Westernblot法检测三组蜕膜组织FOXP3蛋白表达水平,再利用结合重亚硫酸盐的测序法(BSP)检测三组FOXP3增强子甲基化情况,结合临床进行分析。结果1.单因素方差分析结果提示,三组蜕膜组织FOXP3蛋白表达水平存在差异,p<0.01;两两比较发现,URSA组FOXP3蛋白

4、表达水平显著低于对照组1和对照组2,差异具有统计学意义(P值均<0.01);而对照组2与对照组1FOXP3蛋白表达水平差异无统计学意义,P=0.212,大于0.05;2.通过BSP法及单因素方差分析发现,URSA组FOXP3增强子甲基化水平显著高于对照组1和对照组2(P值均<0.01);对照组1FOXP3基因甲基化水平与对照组2无显著差异,P=0.141,大于0.05;3.FOXP3蛋白表达水平与FOXP3增强子甲基化水平成负相关(r=-0.861,P<0.05)。结论不明原因复发性自然流产可能与蜕膜

5、组织FOXP3增强子高甲基化水平导致的FOXP3蛋白低表达有关;而绒毛染色体异常的复发性自然流产的发生与FOXP3的关系不大。关键词:不明原因复发性自然流产FOXP3增强子甲基化IABSTRACTObjectivesToinvestigatethelevelofFOXP3enhansermethylationandproteinexpressioninrecurrentspontaneousabortion,andelucidatethepathogenesisofURSA.MethodsAfterg

6、ettingthecontentofthepatients.Wecollectedthevillianddeciduaofthepregnancywomen.Throughresultsofchorionicvillichromosome,wedividedalltheresearchobjectsintothreegroups:recurrentspontaneousabortionpatientswithnormalembryochromosome(asunexplainedrecurrentsp

7、ontaneousabortiongroup,thatisURSAgroup,total56cases),recurrentspontaneousabortionpatientswithabnormalembryochromosome(ascontrolgroup1,total24cases),normalpregnantwomen(ascontrolgroup2,total39cases).WesternblotwasutilizedtotestthelevelofFOXP3proteinindec

8、iduasofthreegroups.Bisulfite-assistedgenomicsequencingPCR(BSP)wasusedtotestthelevelofFOXP3enhansermethylationinthreegroups.ResultsThelevelofFOXP3proteininthreegroupswerenotequal,P<0.01,thelevelofFOXP3proteininURSAgroupwassignific

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