虾肝肠胞虫的流行病学及防控技术的研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M150104116上海海洋大学硕士学位论文题目：虾肝肠胞虫的流行病学及防控技术的研究英文题目：TheepidemiologyofEnterocytozoonhepatopenaeiandstudyofpreventionandcontroltechniquesinshrimp专业：临床兽医学研究方向：水产动物疾病控制与流行病学姓名：宋增磊指导教师：黄倢研究员二O一八年五月二十四日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果

2、。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书本学位论文属于

3、不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注孙黎中国科学院海洋研究所研究员主席聂品青岛农业大学教授委员战文斌中国海洋大学教授委员潘鲁青中国海洋大学教授委员中国水产科学研究院黄海水李健研究员委员产研究所中国水产科学研究院黄海水李晨工程师秘书产研究所中国水产科学研究院黄海水2018年5月答辩地点答辩日期产研究所1号楼3楼会议室24日虾肝肠胞虫的流行病学及防控技术的研究摘要近些年来，对虾生长缓慢的现象频发，特别是在东南亚地域，有越来越多的关于对虾生长迟缓的情况相继被报道。这些生

4、长迟缓的对虾中大都可以检测到虾肝肠胞虫(Enterocytozoonhepatopenaei,EHP)。EHP是一种能引起对虾生长缓慢的病原，2004年最早发现于泰国养殖的斑节对虾(Penaeusmonodon)中，2009年被正式命名报道。EHP自被发现以来，给对虾养殖业的产量增长造成了重大影响，大大降低了养殖户的经济效益。本研究通过EHP并样检测方法的评价、养殖场养殖过程的EHP的持续跟踪检测、防治EHP药物初步筛选试验等几个方面，目的在于评价一种高效快速的检测EHP的技术手段，了解EHP在整个养殖过程中的动态变化，明确实际养殖生产中影响EHP流行

5、的因素，初步筛选出几种EHP的有效药物。为了实现对EHP的定量检测，本实验室刘雅梅等建立了TaqMan探针法实时荧光定量PCR用于检测EHP。经实验证实，此方法达到了检测方法的标准，能够用来定量检测实际样品。然而在实际的定量检测方法应用中，因为流行病学调查的样品量大，若每份样品均进行单尾检测，工作量是巨大的，因此，为了减少检测工作量和成本，扩大EHP流行病学调查的覆盖范围，本文评价了一种基于TaqManqPCR检测凡纳滨对虾样品中EHP并样检测的技术方法，并希望用该技术去检测接下来采样调查中采集的对虾样品。该方法极大的缩短了检测时间，节省了检测费用，为

6、对虾EHP的流行病学研究提供了简便快速的方法。为了解EHP在整个养殖过程中的动态变化，本研究对山东海阳和潍坊的2家凡纳滨对虾养殖场进行了持续性跟踪调查，测量了整个养殖过程中几个时间点的对虾生长参数，用TaqManqPCR检测了2个养殖场不同时间点各群体对虾的EHP感染载量。结果表明，2个群体在不同养殖时间的EHP阳性率和载量均有不同程度变化，且EHP变化规律存在较大差异。接着对体长与EHP载量之间的关系作进一步分析，结果表明在养殖过程中某一时间点的EHP载量与对虾生长状况并不一定能表现出固定相关性特征，但按正态峰子群进行分析，在这些子群体的个体集中基本

7、均能表现出了EHP对数与体长的负相关性，且每个批次的主体部分均不同程度地显示出这种负相关性具有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)的意义，这能解释前期研究中群体的EHP与对虾生长参数呈现显著负相关性。对2个群体不同养殖阶段所采集的样品的EHP对数的分布进行高斯分布分析，2个群体阳性样品的EHP对数分布范围上，山东海阳(HY)群体普遍大于同时期山东潍坊(WF)群体，这表明WF群体中各时期的EHP感染水平较为接近，HY群体相应时期的EHP感染水平差异大。目前尚无EHP有效药物的公开报道，本研究在前期工作中开展了EHP药物筛选工作，首次找到了2种对E

8、HP有效的驱虫药物，药物浸泡和投喂均可有效降低虾体中EHP的病原载量，因此本论文在此基础上，通