产PSP链状亚历山大藻共附生细菌多样性及藻菌关系研究

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1、上海海洋大学硕士学位论文学校代码：10264研究生学号：M150250448上海海洋大学硕士学位论文产PSP链状亚历山大藻共附生细菌多样性及题目：藻菌关系研究Speciesdiversityandbacteriainfluenceonthe英文题目：productionofparalyticshellfishtoxinsbytoxindinoflagellateAlexandriumcatenella专业：食品工程研究方向：海洋微生物及其天然产物姓名：唐莹莹杨桥（副研究员）指导教师：樊成奇（研究员）二O一八年四月三日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学学位论文原创性声明本人

2、郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、

3、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文产PSP链状亚历山大藻共附生菌多样性及藻菌关系研究摘要有害赤潮（harmfulalgalbloom，HABs）是全球性的严重海洋生态灾害及重大环境热点问题，其产生的赤潮毒素经食物链传递严重威胁人类生命安全与健康。其中，麻痹性贝类毒素（ParalyticShellfishPoison，PSP）是已知贝类毒素中分布最广、毒性最强、对人类威胁最严重。但PSP来源问题仍悬而未决，藻菌关系是揭示PSP产生机制的

4、关键，而解析产毒赤潮甲藻来源共附生菌多样性研究是解析藻菌关系的必要前提。本研究选取典型赤潮甲藻－链状亚历山大藻（LZT09）为研究材料，通过免培养环境微生物高通量测序分析，解析了LZT09来源共附生菌的物种种类及其丰度。结果表明，LZT09来源共附生菌包括6个门，其中优势门4个，包括变形菌门（Proteobacteria，53.9%），拟杆菌门（Bacteroidetes，27.5%），蓝藻门（Cyanobacteria，16.8%）及螺旋菌门（Spirochaetae，1.5%）。包括34个属，其中优势属（>5%）包括15个，分别为Cryomorphaceae科未知属（2

5、2.8%），Cyanobacteria纲未知属（16.8%），Saccharospirillum（14.6%），Rhodobacteraceae科未知属（7.9%）与Maricaulis（5.6%），其中未知属比例高达50.6%，表明链状亚历山大藻（LZT09）蕴含发掘特殊生境微生物新种的巨大潜力。I上海海洋大学硕士学位论文通过微生物纯培养技术分离获得12株可培养细菌，从中筛选发现菌株LZ-16-1产dcneoSTX。对可能的微生物新种LZ-7进行了多相分类学鉴定。结果表明，菌株LZ-7为革兰氏阴性菌，短杆，需氧，最适生长盐度6%（w/v），最适生长温度28℃，最适生长pH

6、7。主要极性脂组分包括磷脂酰甘油（PG）、磷脂酰乙醇胺（PE）及卵磷脂（PC）。主要脂肪酸组分包括C18:1ω7c（65.33%），其次是C16:0（9.27%），C18:0（7.56%），C18:1ω7c11-metyl（5.6%），C17:0（3.83%），C12:0-3OH（3.75%），C12:1-3OH（2.20%）；主要醌为Q10。菌株16SrRNA基因测序及比对结果表明，LZ-7与PonticoccuslitoralisCL-GR66T（98.37%）同源性最高。因此，将LZ-7鉴定为Ponticoccus属的一个新种，命名为Ponticoccussp.LZ-

7、7。藻菌关系分析实验结果表明，通过30μg/mL头孢噻肟钠和50μg/mL万古霉素联合处理可基本上去除链状亚历山大藻（LZT09）共附生菌。加入抗生素处理与原始藻所产PSP毒素种类无变化，但其PSP产量较原始藻降低约78%。关键词：链状亚历山大藻，共附生细菌，生物多样性，多相分类学，麻痹性贝毒II上海海洋大学硕士学位论文Biodiversityandtheinfluenceofthebacterialcommunityontheproductionofparalyticshellfishtoxinsofthetox