溶藻细菌噬菌体和抗噬菌体溶藻细菌的研究及夏门海域藻类病毒的多样性分析

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1、厦门大学硕士学位论文溶藻细菌噬菌体和抗噬菌体溶藻细菌的研究及夏门海域藻类病毒的多样性分析姓名：蔡雯蔚申请学位级别：硕士专业：水生生物学指导教师：郑天凌201106摘要海洋病毒可以通过直接侵染并裂解有害赤潮藻控制赤潮的发生与消亡，也可以通过间接调节溶藻细菌的动态变化来影响赤潮的生消过程。本论文拟通过对溶藻细菌噬菌体和抗噬菌体溶藻细菌的研究及厦门海域病毒群落结构的分析，完善“浮游植物．细菌．病毒”三者的相互作用，并为“以菌治藻”，“以病毒治藻”提供科学依据。主要取得以下成果：1从厦门海域分离得到能裂解溶藻细菌Pseudoaltermonassp．SP48的噬菌体Pse

2、udoaltermonassp48．oZCWl。该噬菌体具有一个等面积(直径约123nm)的头部和长约235nln的可伸缩的尾部，属于病毒分类学的肌病毒科(Myoviridae)。aZCWI对氯仿具有抗性，表明其衣壳内不含脂类物质。感染宿主细菌时，在宿主细胞内的潜伏期约为90rain，宿主菌被裂解时，每个细胞平均约释放91个子代噬菌体。该噬菌体具有较强的感染专一性，在受试的20株细菌中，仅Pseudoaltermonassp．SP48菌株能被其感染。对噬菌体进行核酸类型鉴定后，证实噬菌体oZCWl为双链DNA病毒。2分离得到对噬菌体oZCWI有抗性的突变株SP48

3、．M。通过建立“Alexandriumlamarense，SP48-M，oZCWI”共培养体系发现SP48．M能在体系中保持较高的密度，其杀藻效果不受噬菌体加入的影响。抗噬菌体杀藻细菌的首次发现使“以菌治藻”更具有应用价值。3对厦门海域进行藻病毒多样性研究中，从水样中成功扩增了pol基因片段，构建了polDNA文库，研究藻病毒群落组成。站位S2呈现与其他三个站位较不同的藻病毒多样性，站位S5、S7与SIO的多样性较为相似。发现约27个种，其中9个新种。Neighborhood-JoiningTree和Maximum-LikehoodTree构建结果表明，厦门海域藻

4、病毒大致为三个分支，主要类群为Ostreococcuslucimarinus藻病毒。关键词：溶藻细菌；噬菌体；突变菌株；病毒多样性。AbstractMarinevirusesinfluencealgalbloomdeclineeitherbydirectlyinfectingandlysisingharmfulalgaeorbyindirectlymodulatingalgicidalbacteriophagedynamic．Inthisstudy,bacteriophageinfectingalgicidalbacteriaandphage—resistanta

5、lgicidalbacteriawereisolatedtoexploretheinteractionsofharmfulalga，bacteriaandphages，whichcouldalsoprovidetheoreticalbasisfornABscontrolusingalgicidalbacteria．Further,diversityofalgalvirusesinXiamenSeaAreawasexaminedtoprovidethefirstsurveyofphycodnavirusdiversity．Resultsareasfollows：lA

6、bacteriophageabletoinfectalgicidalbacteriumPseudoaltermonassp．SP48wasisolatedfromXiamenSeaArea,ChinaandnamedasPseudoaltermonassp．SP48-oZCWlinthisresearch．Phagemorphology,growthcharacteristics，hostrange，nucleicacidsandsomeothertraitswereusedtodescribethisbacteriophage．Transmissionelect

7、ricmicroscopyrevealedthatoZCWIhasanisometrichead(ca．123nmindiameter)andalong,flexible，contractiletail(ca．235nmlong)，morphologicallybelongingtotheMyoviridaefamily．Itiscapableofrapidlysisofhostcellswithaburstsizeofca．91phagespercellandalatentperiodofca．90min．Itsstrongresistancetochlorof

8、ormin