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时间:2019-03-08
《nm23-m2表达载体构建及其在小鼠胚胎着床和早期发育中作用的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所里变的论文是我本人在导师指导下进行的研完工作及取得钓醑完成果.据栽所圭=.除了文中特另!j加以标兰和致谢的地方外,论文中不包含芸他人已经发袁或撰写过的研究成果.也不包台为虿得重只医科六学或其他教百杌椅的学位或证书而使用过的材料,与戎同工作的同百对车研究所做昀任何责献均已在论文中作了明确的谎弓厅井表示谢毒.申请学位论文与资料若宥不宴之处,土人承担一切相关贵仁.学位论文作者茎喜越蕾辑.碰:生:丝学位论文版权使用授权书本人完垒了解重庆匮科大学有关保护知话产毅曲规志,即:许
2、竞生在攻谴学伫霸问论文工作的知识产权章证属重庆星簪土掌.土^保证毕业高校后.发表论文或靛用论文工作成果时署名单位为重,走五鲁太学.掌技膏靛津彗弃南星隶焉差都门或机构造交论文曲矍鞠侔和磋圭、免许沦支蕴至堤簪倍闻.掌捩可以公巧掌伫论文曲垂鄯或善奇内客(保密雨喜棘。÷)百;l车用影17.蠕=?或姜也手曩睬存论交.论文作孝茎名括{教浑签名E期:趟![:兰重庆医科大学硕士研究生学位论文英文缩写英文名称AAmpAPS2.DEODcDNADABDEPCddH20dNTPDTTDNANDPKEBEDl'AEPH.EhH202H
3、RPLALBtuRNAKDa符号说明absorbanceampicillinammoniumpersulfateTwo—dimensionalgeleleetrophoresisBasepaircomplementaryDNAdiaminobenzidinediethylpurocarbonatedouble‘listiliedwaterdexyribonucleosidetriphosphatedithiothreitoldeoxyribonucleicacidducleosidediphosphatekin
4、aseBethidiurnbromideethylenediaminetetraaceticacideppendorfhematoxylin—eosinhourhydrogenperoxidehorseradishperoxidaseLBmediumcontainingampicillinLuria-Bertaniculturemessengerribonucleicacidkilodalton中文名称吸光度氨苄青霉素过硫酸铵二维电泳碱基对互补脱氧核糖核酸二氮基联苯胺二乙基焦碳酸盐取蒸水脱氧核糖三磷酸二硫苏糖醇
5、脱氧核糖核酸核苷二磷酸激酶溴化乙锭乙二胺四乙酸微量离心管苏木素一伊红小时过氧化氢辣根过氧化物酶含氨卞青霉素LB培养基LB培养基信使核糖核酸千道尔顿重庆医科大学硕上研究生学位论文MmmmImMMrNCODPAGEPBSPBSTPCRTBEItT-PCRSDSTaqTEMEDnisulmoleminutemillilitermillimolerelativemolecularwei曲tnitrocelluloseopticaldensitypolyacrylamidegeleletrophoresisphospha
6、tebuffersalinephosphatebuffersolution、Ⅳith0.05%Tween一20polymerasechainreactionTris/bomteeletrophoresisreversetranscriptase-polymerasechainreactionsodiumdodeeylsulphate-polyacrylamidethermosaquaticus(DNApolymerase)tetramethylethylenediaminetrishydroxymethylam
7、inomethanemicroliter摩尔分钟毫升毫摩尔相对分子量硝酸纤维素光密度聚丙烯酰胺凝胶电泳磷酸盐缓冲液磷酸盐吐温缓冲液聚合酶连反应三羟甲基甲烷.硼酸.乙二胺四乙酸逆转录PCR十二烷基硫酸钠耐热DNA聚合酶四甲基乙二胺三羟甲基氨基甲烷微升重庆医科大学顼士研究生学位论文am23-M2表达载体构建及其在小鼠胚胎着床和早期发育中的作用研究摘要目的:本实验通过构建nm23-M2原核表达质粒,表达并提纯重组蛋白,制各其抗体,为进一步研究nm23.M2基因的功能和蛋白的作用奠定基础。并从基因和蛋白水平研究rim2
8、3.M2在小鼠胚胎着床和发育早期子宫内膜中的表达、分布规律及动态变化,探讨其作用机理,为探索人类胚胎着床和早期发育机制提供实验基础和理论依据。方法:1.RT-PCR法扩增rim23.M2基因,经限制性内切酶酶切后克隆入原核表达载体pQE30中,构建原核表达质粒并进行酶切和DNA双向测序鉴定。2.将重组质粒在大肠杆菌中表达,用SDS,PAGE和免疫印迹鉴定,亲和层柝法纯化。纯化的重组蛋白
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