去甲斑蝥素对人胰腺癌panc-1细胞凋亡的作用研究

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1、洲州K学院f飒f’学位论文论文题目：答辩委员会主席：毖邀(副熬援】答辩委员会成员：湍州医学院坝Ij学位论迎目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·1前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·5刖吕⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’3材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。6结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”17小结···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯·⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”20附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘24参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”32渊州阪学院颁f+学似睑文去甲斑蝥素对人胰腺癌PANC．1细胞凋亡的作用研究中文摘要目的：探讨去甲斑蝥素(NCTD)对人胰腺癌细胞PANC

3、．1细胞增殖和细胞凋亡的影响及机制。方法：1、在体外培养人胰腺癌细胞PANC．1细胞，分别用不同浓度的去甲斑蝥素fNCTD)：1099／mlNCTD(N10组)、50l上g／mlNCTD(N50组)、100gg／mlNCTD(N100组)以及对照组(N组)作用24、48、72d'时后，用MTT法检测NCTD对各组细胞的增殖抑制率。2、收取处于生长对数期的人胰腺癌细胞PANC．1细胞，经不同浓度的去甲斑蝥素(NCTD)：1099／mlNCTD(N10组)、50Irtg／mlNCTD(N50组)、100gg／mlNCTD(N100组)以及对照

4、组(N组)作用24、48、72d,时后，采用AnnexinV—FITC／PI双标记，应用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。3、收集人胰腺癌细胞PANC．1细胞，经不同浓度的去甲斑蝥素(NCTD)：1099／mlNCTD(N10组)、50gg／mlNCTD(N50组)、100gg／mlNCTD(N100组)以及对照组(N组)作用24、48、72d'时后，提取细胞总蛋白，用Westernblot检测细胞的NF．KB活性表达。结果：l、不同浓度的NCTD10I

5、tg／mlNCTD(N10组)、501土edmlNCTD(N50组)、100Itg／ml

6、NCTD(N100组)作用人胰腺癌PANC．1细胞作用24、48、72d,时后，对人胰腺癌细胞PANC．1均有细胞增殖抑制作用，并呈剂量和时间依赖性。在同一作用时问点，N10组、N50组和N100组细胞抑制率与对照组相比均有显著性差异(P<0．01)。在同一NCTD浓度作用下，24、485[172d'时组的细胞抑制率和对照组相比均有显著性差异(P<0．01)。2、不同浓度的NCTD101上g／mlNCTD(N10组)、50Irtg／mlNCTD(N50组)、100}tg／mlNCTD(N100组)作用人胰腺癌PANC一1细胞作用24、48

7、、72d,n寸后，处于S期的细胞比例逐渐增多，而处于G0／G1期的细胞比例逐渐减少。同时，各组的细胞的早期凋亡率，随着药物浓度的升高而明显增加，各NCTD处理组与对照组相比均有显著性差异(P<0．01)。3、不同浓度flqNCTD10pg／mlNCTD(N10组)、50Ltg／mlNCTD(N50组)、100}tg／mlNCTD(N100组)作用人胰腺癌PANC一1细胞作用24、48、72+时温州医学院ff!}!}’学位论爻后，WesternBlot结果示，NCTD可明显下调PANC．1细胞中NF-KB的表达。各NCTD处理细’』对照组相

8、比均有显著性差异(P<0．05)。结论：去甲斑蝥未(、NCTD)对人胰腺癌细胞PANC．1有明显的细胞增殖抑制作用。NCTD对人胰腺癌细胞PANC．1的增殖抑制作用与细胞周期阻滞和凋亡诱导有关。其中，NCTD的细胞周期阻滞和凋亡诱导作用可能与抑制NF-KB的表达有关。关键词：去甲斑蝥素；胰腺癌：细胞凋亡；NF—KB温卅I医学院颁ij学似论迁StudyontheApoptoticEffectofNorcantharidinonHumanPancreaticCancerPANC．1cellsAbstractobjective：Toinvest

9、igatetheeffectsofnorcantharidin(NCTD)tohumanpancreaticcancercelllinesPANC—lcellproliferationanda