抑制素免疫对崇明白山羊雌性超数排卵及雄性生殖发育的影响

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1、学校代码：10264研究生学号：M150104109上海海洋大学硕士学位论文抑制素免疫对崇明白山羊雌性超数排题目：卵及雄性生殖发育的影响Effectofinhibinimmunizationonfemale英文题目：superovulationandmalereproductionperformanceofChongmingwhitegoat专业：临床兽医学研究方向：动物胚胎工程姓名：葛雷指导教师：张德福研究员二O一八年四月十五日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员

2、名单姓名工作单位职称备注李家乐上海海洋大学教授主席刘惠莉上海市农业科学院研究员委员李震上海市农业科学院研究员委员蒋杰贤上海市农业科学院研究员委员郑洪建上海市农业科学院研究员委员范晓芬上海市农业科学院助理研究员秘书农科院华漕院区机答辩地点答辩日期2018.05.25关楼二楼会议室上海海洋大学硕士学位论文本研究由上海市科委试验动物专项（15140900300，17140900100）；上海市农委青年人才计划（沪农青字（2015）第1-36号）；上海市农业科学院攀高计划（PG171）提供资助上海海洋大学硕士学位论文抑制素免疫对崇明白山羊雌性超数

3、排卵及雄性生殖发育的影响摘要抑制素（Inhibin,INH）是一种主要由雄性动物睾丸支持细胞和雌性动物卵巢颗粒细胞分泌的糖蛋白激素。抑制素主要生物学功能是特异性作用于垂体，抑制卵泡刺激素（Follicle-stimulatinghormone,FSH）的合成和分泌，且呈剂量依赖关系。此外，抑制素还可以通过旁分泌或自分泌途径直接作用于性腺而影响其功能。抑制素免疫是指通过特异性抗体减弱动物体内内源性抑制素对FSH分泌的抑制作用，从而使动物体内FSH水平上升，达到增强动物繁殖力的效果。本研究利用抑制素主动免疫崇明白山羊，分别探究抑制素免疫对其体

4、内相关激素水平、母羊超数排卵及公羊睾丸发育的影响。本文共分为以下两部分：1、抑制素主动免疫结合常规超排处理（CIDR-FSH-PGF2α-LH），探究其对崇明白山羊超数排卵效果的影响在第1d、21d利用重组抑制素蛋白对崇明白山羊（n=10）共进行2次免疫，并设置对照组（n=10）。在21d埋植CIDR，32d开始采用FSH三日递减法进行超排处理。发情后配种，48h后手术冲胚。试验期间测量血清FSH、黄体生成素（Luteotropichormone,LH）、抗缪勒管激素（Anti-Mullerianhormone,AMH）、孕酮（Proge

5、sterone,P）和雌二醇（Estradiol,E2）激素水平；冲胚时观察单侧卵巢的排卵点个数和冲胚数。结果表明：试验组单侧卵巢的排卵点个数（11.69±1.40个）及冲胚数（9.88±1.64个）均显著高于对照组（8.20±1.44个；6.92±1.62个）（P<0.01）；试验组血清FSH、AMH激素水平显著高于对照组（P<0.05）；试验组和对照组血清LH、P、E2激素水平并没有显著差异（P>0.05）。I上海海洋大学硕士学位论文2、通过抑制素主动免疫崇明白山羊断奶公羔羊，探究其对公羔羊生殖发育的影响在第0d、21d、42d、63

6、d利用重组抑制素蛋白对崇明白山羊断奶公羔羊（n=6）共进行4次免疫，并设置对照组（n=6）。试验期间测量体重（Bodyweight,BW）、阴囊周长(Scrotumcircumference,SC)、血清FSH、LH、睾酮（Testosterone,T）激素水平，并第84d阉割后制作睾丸组织石蜡切片、检测睾丸组织生殖相关基因的表达情况。结果显示：试验期间免疫组和对照组BW、SC并没有显著差异（P>0.05）；阉割时，免疫组和对照组体重（21.87±2.19kgvs23.58±5.13kg）、阴囊周长（20.95±0.74cmvs21.57

7、±1.65cm）、睾丸重量（Testesweight,TW）（56.88±4.96gvs62.99±4.17g）没有显著差异（P>0.05）；石蜡组织切片观察发现睾丸组织在组织学上也无显著差异；免疫组血清FSH、T激素水平在二免7d后显著高于对照组（P<0.05），其余时间上无显著差异（P>0.05）；免疫组和对照组血清LH激素水平并无显著差异（P>0.05）；抑制素免疫极显著提高Dmrtc2表达水平（P<0.01），显著提高SOX30表达水平（P<0.05），显著降低AR表达水平（P<0.05），对FSHR、LHR、GPx4、DDX4表

8、达水平没有显著影响（P>0.05）。结论：抑制素免疫能显著提高崇明白山羊超排后FSH和AMH激素水平，从而显著提高超排效果；抑制素免疫对崇明白山羊公羔羊生殖发育并没有显著促进作用。关键词：崇明