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1、中国畜牧兽医2009年第36卷第10期流行病防治·179·猪流感诊断技术研究进展12毕保良,李进涛(1.云南农业大学动物科学技术学院,昆明650201;2.昆明医学院实验动物中心,昆明650031)摘要:猪流感是由甲型流行性感冒病毒感染引起的一种急性呼吸道传染病。除常规的临床症状及病理变化诊断外,猪流感的确诊依赖于实验室诊断方法,方法主要有电镜技术、病毒分离和鉴定、血清学试验、免疫学试验、分子生物学方法等。作者从传统的实验室诊断技术和分子生物学诊断技术两个方面综合阐述了猪流感的诊断研究进展,为SIV的临床快速诊断和深入研究提供科学依据。关键词:猪流感;诊断技术中图分类号:S858.28
2、文献标识码:A文章编号:167127236(2009)1020179205流感病毒属于正黏病毒科(Orthomyxoviri2David等(1991)也从死于肺炎的27岁动物饲养员dae),根据病毒抗原特性及其基因特性的不同,流感体内分离到H1N1猪流感病毒,命名为A/Mary2病毒分为甲(A型)、乙(B型)、丙(C型)三型。流感land/12/91(A/MD),通过该毒株RNAs寡聚核苷病毒颗粒结构由外至内分为3层,最外层有2种表酸基因定位发现与当时流行的猪流感病毒有所差面抗原,即血凝素(HA)抗原和神经氨酸酶(NA)抗异,但与当时流行的猪流感病毒的血凝素、核蛋白、原,是划分流感病毒
3、亚型的依据。中间层为类脂膜M基因序列有很高的同一性。猪呼吸道上皮细胞下面的基质蛋白(M1)形成的厚的球形蛋白壳,具有表面同时存在人流感病毒受体SA2α22.6Gal和禽流维持病毒外形及保护核衣壳的作用。最内层为核衣感病毒(AIV)受体Sa22.3Gal。因此,Jeffery等壳,由病毒基因组与核蛋白(NP)组成。NP和M1(2001)和Jun等(2009)认为猪在流感大流行中起着是决定流感病毒型别的主要型特异性抗原。流感病重要作用,它是人与禽流感病毒间发生基因重排的毒不断引起流感流行,主要因其HA和NA的抗原重要场所,是人流感病毒和禽流感病毒的“混合器”,性容易发生变异所致,其中以甲型
4、流感病毒的抗原即猪体可以同时感染不同种、不同亚型的流感病毒。变异最为重要,它与流感的世界性大流行密切相关2009年3月在墨西哥、美国等地暴发的甲型H1N1(By等,1970)。目前认为抗原漂移的主要原因是病流感病毒,是一种新型的变异病毒株,这种新型流感毒抗原基因的突变及宿主对病毒选择作用的结果,病毒具有病毒杂交特性,它包含人流感病毒、禽流感而抗原转换的机理主要是基因突变和重配。乙型病病毒和猪流感病毒的基因片段,同时拥有亚洲猪流毒变异性较弱,丙型病毒抗原相对稳定(殷震等,感和非洲猪流感病毒特征。1997)。猪流感(swineinfluenza,SI)是甲型(A型)流感尽管不同亚型猪流感病
5、毒(swineinfluenzavi2病毒引起的猪或人的一种急性、人畜共患呼吸道传rus,SIV)之间可以组成很多种流感病毒血清型,但染性疾病。猪流感的临床症状为体温突然升高(40是可造成人感染猪流感病毒的血清型主要为～42℃),食欲减退或废绝,精神沉郁,呼吸困难,呈H1N1、H1N2和H3N2。By等(1978)从加拿大的腹式呼吸并常伴有阵发性咳嗽。从眼和鼻流出黏性野鸭中分离到H1N1亚型猪流感病毒。Paul等分泌物,鼻分泌物有时带血。各种年龄、性别、品种(1989)从威斯康辛州死于病毒性肺炎的妇女尸体中猪均能感染。猪流感病毒能与猪繁殖与呼吸障碍综分离到H1N1猪流感毒,并命名为A/
6、Wisconsin/合征病毒、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、3523/88。同时通过RNA指纹图谱分析和7段基副猪嗜血杆菌等混合感染或继发感染,致使猪死亡因序列分析得出人感染的流感病毒的基因序列与当率升高。猪流感不仅给养猪业造成重大经济损失,时流行的猪流感基因序列很相似,表明猪流感的主还对人类健康造成威胁,因此研究快速、敏感、准确要基因序列不变与人感染猪流感的发病率无关。的诊断猪流感的方法,具有重要的经济价值和公共卫生意义。依据临床症状和流行病学特点很难对猪收稿日期:2009205231流感作出确诊,确诊还需借助实验室诊断技术。作·180·流行病防治中国畜牧兽医2009年第36卷
7、第10期者从传统的实验室诊断技术和分子生物学诊断技术才能取得确切的试验结果。SN在研究应用中较广等方面对SI的诊断技术研究进展作一综述。泛,但其操作繁琐、时间长,故很少用于临床进行疾1传统的实验室诊断技术病诊断。但其作为经典方法在病毒分离鉴定中起重1.1电镜技术近年来随着电镜样品制备方法的要的作用,许多新的检测方法都要以其为标准方法不断改进,利用电镜技术快速识别和检测临床样品进行比较研究(ByRichard,1996)。中的病毒和病毒成分已成为
