猪痢疾诊断技术研究进展

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1、著(P>0．05)。这些结果表明白细胞游走抑制琼脂糖试验可以用于诊断SD。2．3荧光抗体试验(FAT)Ponhkon等采用兔的高免血清制备出荧光标记抗体，在每l0个视野中平均检出45个猪痢疾短螺旋体，而应用普通光学显微镜仅发现l6个；检查采自猪舍内粪便时，上述指标分别为29和3。健康猪粪便中没有检出猪痢疾短螺旋体。应用该方法能在短时间内(1．5～2h)检出和鉴定猪痢疾短螺旋体。夏来发等[81也做了区分Bh和Ti的研究，应用Ti吸收过的兔抗Bh血清，作IFA来检查Bh，发现无法与Ti图2实验用鼠明确区分。应用

2、于田间检查，对Ti同样呈阳性反应，但比结晶紫染色法见到的菌数明显增加。但是也不能区别Ti和Bh。然而程国富等[91运用单克隆抗体6H荧光标记物(6H—FA)、兔抗Bh荧光标记物(RT—FA)、结晶紫染色法(CVT)对SD病猪粪3头份、健康猪粪1i头份进行了检测，结果表明单抗6H直接荧光检测猪粪样品，可特异性区分开Bh和Ti，应用单抗建立的方法简单、方便、特异性好。2．4微量凝集试验(MAT)Joens和Forsgren的研究报道l1。以1％胎牛(免)血清PBS(pH-7．2)0．05mL分别滴人微量滴定板卜

3、6孔，将10倍稀释灭活被检血清50L加入第l孑L，并倍比稀释图3实验用兔至5孔，第6孔为抗原对照。每孔加抗原50L，经振荡后置38℃l6～l8h，再于室混静置i～2h然后观测结为Ti)。结果表明Bh与Ti高免血清之间有一定的交叉反应，果。几何平均滴度为i：40以上即可认为该猪群感染。肖但滴度是有显著区别的，48头SPF猪血清的效价均在64倍传发等【I略加改进了Joens的MAT方法，进行了抗原稳以下，而92头Bh猪只中血清的抗体含量在l28—2048倍之定性、敏感性及特异性等试验结果表明，该方法对揭示慢间，

4、其中仅有一头猪的滴度为64倍，因此该法可用于猪痢性及隐性感染猪群有一定诊断价值。试验结果表明，一般在疾病猪群的诊断。金梅林等[151应用Bh免疫血清结合葡萄感染后15d开始出现凝集抗体，20d凝集滴度明显升高达球菌A蛋白(SPA)与Hl0、2-5、X23、C17等Bh菌株64～1280倍，50d后开始下降，到74d为80倍，这些结进行协同凝集试验，均出现明显凝集反应。而免疫血清结合果与Joens报告相近。Diarr等[121分别对微量凝集(MA)、不含SPA的菌株、无特定病原(SPF)血清结合含SPA的问接

5、血凝及补体结合试验等3种方法进行了比较。应用煮沸菌株均无凝集反应。免疫血清结合SPA与7种肠道菌均无的Bh菌悬浮液经l0倍稀释作为诊断抗原与采集的血清样凝集反应。品作微量凝集试验，检测未出现明显症状的猪群中痢疾带菌2．5酶联免疫吸附试验(ELlSA)猪的血清抗体，结果表明MA与其它2种检测方法比较，操罗满林等I161以猪痢疾短螺旋体超声裂解冻融物做抗原进作简易而且可靠，是判定测试猪群是否感染猪痢疾的较好方行酶联免疫吸附试验，测定了感染猪血清中的抗猪痢疾短螺法。而王禹志等ll31以活性炭为载体，事先将抗原或抗

6、体吸旋体抗体。ELISA最适条件为：抗原l0g蛋白／毫升，血附在活性炭微粒上，然后用此种带有抗原或抗体的活性炭微清稀释度100倍，酶标结合物1000倍。对103份感染猪血清粒，检测相应的抗体或抗原，根据活性炭微粒的凝集来判定用ELISA和平板凝集试验对比测定表明，两法呈高度正相关，被检材料中是否有相应的抗体或抗原的存在，从而确诊疾病。而且ELISA多检出8．74％的阳性样品。ELISA比平板凝集苏雄等“用根癌土壤杆菌酶的粗提取物加入到培养Bh的试验更敏感，有望成为SD诊断的一种快速方法李绪英1171培养基中

7、后接种Bh，37℃培养5d后，收获并制备Bh抗等应用SPAELISA对采自大同市猪场100头份、太原市猪原。这种抗原在MAT中能防止自凝现象。用这种抗原检测场91头份和忻州市猪场34头份血清样品进行诊断，结果表了2头SD猪血清和6头高免兔血清(其中用5株Bh，l株明，SPAELISA检出阳性150头份(66．57％)，琼扩检出2OlO~第2期SWINEINDUSTRYSCIENCE猪业科学29阳性114头份(50．6％)，两者差异显著。SPA—ELISA中以[3J陈毓川，金梅林．一种适于猪痢疾密螺旋体分离培

8、养和抗原制备酶联SPA代替了酶标抗抗体，酶联SPA制备方法比较简单，的培养基及其菌落形态初步观察⋯．湖北农业科学，1981，(7)：周期短，性能稳定，已有商品出售。该试验具有较高的敏感3436．性和特异性。苏雄等[181应用单克隆抗体(McAb)过氧化物【4】肖传发，刘凤街，易序权，等．猪痢疾及其病原体的分离与鉴定酶一抗过氧化物酶(PAP)桥联酶标方法，在实验室检测8【JJ．山东农业科学，1983，(2)：710