ctgf对体外培养的小鼠vsmcs钙化的作用及其机制研究

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1、中图分类号R589．9UDC610硕士学位论文学校代码密级10533CTGF对体外培养的小鼠VSMCs钙化的作用及其机制研究ResearchoftheEffectsandMechanismsofConnectiveTissueGrowthFactoronCalcificationofVascularSmoothMuscleCellsinVitro作者姓名：黄娟学科专业：临床医学研究方向：内科学(代谢内分泌学)学院(系、所)：湘雅二医院指导教师：彭依群副教授论文答辩日期迎fl。』：』答辩委员会主席中南大学二o·三年五月原创

2、性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：雄日期．_年上月Ⅱ日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内

3、容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者虢丝聊虢日期：龌年上月匹日硕士学位论文中文摘要CTGF对体外培养的小鼠VSMCs钙化的作用及其机制研究摘要目的：血管钙化(vascularcalcification)是动脉粥样硬化、高血压、糖尿病血管病变、血管损伤、慢性肾脏疾病和衰老等普遍存在的病理表现，其关键环节是血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells，VSMCs)转分化为成骨样细胞

4、。研究表明结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)在与血管钙化密切相关的动脉粥样硬化、糖尿病肾病和高血压等疾病的病变区域中表达都增加。本实验研究CTGF对小鼠VSMCs钙化的影响及其可能的作用机制。方法：应用小鼠胸主动脉VSMCs进行体外实验，用免疫细胞化学方法鉴定VSMCs，用O．1％茜素红矿化结节染色，细胞钙沉积含量测细胞钙盐沉积，Real．timePCR和Westernblot方法检测成骨细胞标志物碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(oc)、骨保护素(OPG)、成骨细胞特异性

5、核转录因子(Cbfa。1／Runx．2)以及MAPKs，包括JNK、p38、ERKl／2的mRNA和蛋白质的表达。同时用ERK的特异性抑制剂PD98059阻断ERK通路的激活。结果：培养的原代小鼠胸主动脉VSMCs呈梭型，0【．SMA表达呈强阳性；CTGF持续作用14d后，Real．timePCR和Westernblot表明CTGF可使成骨细胞标志物ALP、OC和OPG的mRNA表达以及成骨细胞特异性核转录因子(Cbfa．1／Runx．2)mRNA和蛋白质的表达增加，且呈浓度依赖性；O．1％茜素红染色和细胞钙含量测定发I

6、I硕士学位论文中文摘要现CTGF可促进血管平滑肌细胞的钙化和钙沉积。Westernblot表明CTGF对JNK及p．38无激活作用，但可以激活ERK通路且其激活高峰在30min左右。同时，应用ERK的特异性抑制剂PD98059，可以明显抑制CTGF诱导的VSMCs成骨细胞标志物的表达及VSMCs钙化。结论：CTGF可以促进体外培养的小鼠VSMCs的钙化，主要是通过ERK信号通路起作用。图16幅，参考文献42篇。关键词：结缔组织生长因子；血管钙化；血管平滑肌细胞；成骨样细胞分类号：R589．9III硕士学位论文英文摘要Re

7、searchoftheEffectsandMechanismsofConnectiveTissueGrowthFactorOHCalcificationofVascularSmoothAbstract：MuscleCellsinVitroObjects：Vascularcalcificationisanactiveandcell—regulatedprocessresembletoskeletalmineralizationandisprevalentinpatientswithatherosclerosis，agill

8、g，end—stagerenalfailure，uremia,andtypeIIdiabetes．Osteogenicdifferentiationofvascularsmoothmusclecells(VSMCs)isessentialinthedevelopmentofvascularcalcification．