重症中暑肝窦内皮细胞损伤的初步研究

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2、入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名i崔掌言L、^o化日期：沪f牛年』月jFt文导师签摘要lUlllIlUllIllIIIlll1IIlY2623298目的：1．观察重症中暑大鼠肝损伤变化规律。2．探讨肝窦内皮细胞(SEC)在重症中暑大鼠肝损伤过程中结构及功能损伤的表现。3．探讨血必净预处理后，肝脏及肝窦内皮细胞(SEC)在组织学损伤、炎症损伤、微循环障碍等方面的变化。方法：1．建立重症中暑大鼠模型，按不同中心体温组采集标本。成年SPF级雄性Wista大鼠共36只，体重约250—3

3、509之间，将其随机分为6组，：A．室温对照组(Sham组)6只，于实验开始后第90分钟时处死并采集标本；B．中心体温39℃组6只，造模过程中大鼠中心体温达到39℃时立即将其处死并收集标本；C．中心体温42。C组6只，造模过程中大鼠中心体温达到42。C时立即将其处死并收集标本；D．重症中暑组(HS组)6只，大鼠造模成功后立即将其处死并收集标本；E．血必净预处理重症中暑组(XBJ组)6只，造模前48小时尾静脉注射血必净注射液预处理，大鼠造模成功后立即将其处死并收集标本；F．生理盐水预处理+重症中暑组(XBJ组)6只，下文简称为saline组，造模前48小时尾静脉注射

4、与血必净注射液同等剂量的生理盐水预处理，大鼠造模成功后立即将其处死并收集标本。2．动态观察观察重症中暑形成过程中梯度热打击处理后大鼠肝酶谱及肝脏病理损伤情况、超微结构变化及细胞凋亡变化。2．1检测大鼠血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)浓度。2．2HE染色后光镜下观察各组大鼠肝脏组织学变化。2．3TUNNEL方法检测各组肝脏细胞凋亡情况。3．动态观察各组SEC损伤规律，包括各组大鼠循环血中SCE损伤标记物的浓度以及血管舒缩物质的浓度变化、SEC超微结构的变化、相关因子的表达变化。3．1检测各组大鼠血清中SEC损伤标志物的浓度，包括血栓调节蛋白(TM)、

5、透明质酸(HA)、(vWF)；3．2透射电镜下观察各组SEC的超微结构变化。3．3免疫组化方法检测各组大鼠肝脏中SEC表达vWF、组织因子(TF)、TM的变化。3．4PCR方法检测各组SEC表达粘附分子(ICAM-1)、白介素-6(IL-6)、TF的变化。3．6检测大鼠循环血中内皮素一I(ET一1)及一氧化氮(NO)浓度的变化。结果：1．热打击中暑大鼠从42℃组开始出现明显肝损伤，且其程度随温度梯度增高而增加，以HS组及saline组为明显。1．1中暑大鼠血清AST、ALT浓度HS组与saline组较对照组明显增高，42℃组次之(P

6、(P

7、：42℃组、HS组与saline组较对照组高，XBJ组则次之，数据差异明显(p

8、2℃及HS