苦瓜提取物对hepg2胰岛素抵抗细胞的调节作用研究

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1、万方数据苦瓜提取物对HepG2胰岛素抵抗细胞的调节作用研究RegulatingEffectsofBitterMelonextractsonInsufinResistantHepG2Cell姓2015年6月万方数据独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果,也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。2学位论文作者签名:鳓,纠厂年6月产

2、目万方数据学位论文版权使用授权书IIIIIIIIIIIII11111111111IIIY2799405江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致,允许论文被查阅和借阅,同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国学位论文全文数据库》并向社会提供查询,授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。论文的公布(包括刊登)授权江苏大学研究生院办理。本学位论文属于不保密口。学位论

3、文作者签名:引甥沙气年6具一日艚撕躲专手3.-oc厂年b月f0日万方数据江苏大学硕士学位论文摘要肥胖和2型糖尿病是影响人类健康的主要非传染性慢性疾病,胰岛素抵抗是其重要特征。目前已有多种改善胰岛素抵抗的化学合成药物,但长期服用此类药物会加速脂肪细胞的分化,引起体重增加。因此筛选安全且有效改善胰岛素抵抗的食物或药食同源食物具有重要意义。苦瓜(MomordicacharantiaL.)作为一种药食同源的食品,其含有多种活性成分具有调脂降糖功效,可通过提取苦瓜的不同组分,研究其改善胰岛素抵抗功效及其作用途径的异同点。本文以粒度≤150}tm的苦瓜冻干粉为原料,提取苦瓜醇提物、水提物、水提多糖、碱提

4、多糖和皂苷,采用HepG2胰岛素抵抗细胞模型,研究不同苦瓜提取物对胰岛素抵抗的干预作用(模型建立期间和建立后)及其作用途径。主要研究内容及结果如下:1.制备了不同的苦瓜冻干粉提取物并分析了其主要组成。结果表明:苦瓜水提多糖、碱提多糖和皂苷的纯度分别为83.40%、84.80%和56.53%;苦瓜醇提物中多酚含量最高(3.34%);苦瓜水提物中蛋白含量最高(1.77%)。苦瓜水提多糖和碱提多糖均为杂多糖,含有D一型糖苷键和吡喃环,单糖均由L.鼠李糖、甘露糖、D.葡萄糖和L.半乳糖组成,摩尔比分别为16.81:2.07:1.00:1.79和8.63:O.65:1.00:0.33。2.研究了Hep

5、G2胰岛素抵抗细胞模型的建立方法及其稳定性。结果表明:棕榈酸的最佳诱导浓度和时间分别为O.15raM和12h,诱导后细胞葡萄糖消耗量显著降低,产牛胰岛素抵抗;HepG2胰岛素抵抗细胞模型建立后,稳定时间至少为48h。3.采用HepG2胰岛素抵抗模型,研究了苦瓜提取物对模型细胞糖脂代谢的调节作用。结果显示,苦瓜醇提物、水提物、碱提多糖和皂苷均能有效的改善胰岛素抵抗细胞的糖脂代谢;其中苦瓜碱提多糖和皂苷增加细胞葡萄糖消耗量的效果最为显著,与二甲双胍相当;750}tg/mL苦瓜碱提多糖和250肛g/mL苦瓜皂苷增加细胞内糖原含量的效果最优;各组苦瓜提取物均能显著降低甘油三酯含量(p

6、制脂质积累。4.研究了不同苦瓜组分对HepG2胰岛素抵抗细胞的能量代谢和抗氧化水平的影响。结果表明:后期和中期干预试验中苦瓜醇提物、皂苷和碱提多糖均能显万方数据苦瓜提取物对HepG2胰岛素抵抗细胞的调节作用研究著增加细胞的ATP含量,且苦瓜水提物对模型细胞的中期干预效果优于后期;苦瓜醇提物、水提物、皂苷和碱提多糖均能显著降低模型细胞ROS(活性氧)含量(p<0.05),且碱提多糖的效果最优。说明苦瓜提取物能促进HepG2胰岛素抵抗细胞的能量代谢,减轻氧化应激。5.研究了不同苦瓜组分改善HepG2胰岛素抵抗细胞的作用途径。结果表明:苦瓜醇提物、水提物、碱提多糖和皂苷均能激活IRSl-P13K.

7、AKT(胰岛素受体底物1.磷脂酰肌醇3激酶.蛋白激酶B)和AMPK.ACC2一CPTl(腺苷酸活化蛋白激酶.乙酰辅酶A羟化酶2.肉毒碱棕榈酰转移酶1)信号通路,上调PGC.1a(过氧化物酶体增殖活化受体Y共激活因子一la)和GLUT4(葡萄糖转运蛋白4)mRNA的表达水平,下调PEPCK(磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶)和JKNl(c-Jun氨基末端激酶1)mRNA的表达水平,从而调节细胞的糖脂代谢,改善胰岛素抵抗;

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