植物石蜡切片的固定与保存

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1、198安徽农学通报,AnhuiAgn.Sci.Bul1.2010,16(1)植物石蜡切片的固定与保存王原媛张定宇黄春国(山西农业大学,山西太谷030801)摘要:石蜡切片是观察植物组织构造常用的制片方法之一。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,才能清晰辨认其形态结构。重点研究了植物石蜡切片的固定与保存,拟为今后固定剂及固定方法的选择提供科学依据。关

2、键词:石蜡切片;固定;保存中图分类号Q943.1文献标识码A文章编号1007—7731(2010)01—198—03ResearchofPlantParaf'mSectionsFixationandPreservationWangyuanyuaneta1.(ShanxiAgriculturalUniversity,Taigu030801,China)Abstract:paraffinsectionisoneofthemethodscommonlyusedinobservationofplanttissue.Livingcells

3、ortissuesaremost.1ycolorless,transparent,andcellsamongthevariousorganizationswithinthelackofcontrastbetweenthevariousstructures,Undernormallightmicroscope,noteasytoclearlydistinguishTheorganizationwilldiesOOnafterleavingthebodyandpro—ducetheorganizationofcorruption,l

4、ossofnormalstructureoftheoriginal,therefore,theorganizationmustbesubjecttofixed,embeddedinparafin,slicedandstainedtissuedeathandotherstepstoavoid,butcanclearlyidentifytheirmorpho—logicalstructure.Thispaperfocusesonfixedparafinsectionsofplantandpreservationforfuturefi

5、xed——agentsandafixedmethodofprovidingascientificbasis.Keywords:Paraffinsections;fixed;save石蜡切片(paraffinsection)石蜡制片又叫永久制片,固定时要对材料进行真空抽气。组织、细胞中都有空组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。其优点主气会阻止固定剂渗透到组织中,使固定不全面、不彻底,影要是适合各种植物组织的制片,切片的厚薄易于控制(最响后续的浸蜡、切片等等。抽气最好用抽气泵抽气,简易薄可达0.5m),清晰度很好,亦适合作细胞学

6、研究,并能的可以用针筒抽气,或用来自水抽气装置抽气。另外,固够制成连续切片,制片易于长久保存,易于交流等。但制定的时间要足够。片周期较长,易受条件限制,制片中使用化学试剂较多,对2保存人有一定毒害,易使材料变脆、变硬或变形,某些内含物易材料经过固定后,需要保存下来以备利用,这一过程于消失,常使组织变小,甚至使组织扭转变形,细胞所含物中,要求材料的结构不会发生变化。有些杀死剂和固定剂质缩小而折光性增强,影响观察正确性,且制片成本较高本身就是很好的保存剂,有些则不然。通常使用的保存剂等。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制是

7、70%的酒精溶液,可以使一般的材料保存较长时间不备的。至于变坏。通常还要求在冰箱中保存。1杀死和固定2.1好的固定剂特点(1)渗透力强,迅速杀死原生质,并将观察材料尽快置于特定的药剂(固定剂)中,将其显示出其原来的细微结构。(2)增加细胞的结构及内含物的细胞迅速杀死,并使它尽力保持生活时的自然状态(固折光程度,使各部分结构更为清晰,有利于显微镜观察。(3)定),而不至于在细胞死亡之前材料的形状和结构发生变使组织适当地变硬,并据有一定的坚韧性,便于切片。过于坚化,如结构发生萎缩变化或分解。这一过程称为杀死和固硬或松脆,不利于切片。

8、(4)促进生物或细胞对某些染色剂定,要求越快越好。的媒染作用,能使组织增加染色能力,使组织或细胞不发生收固定时的注意事项:固定液的用量要达到材料体积的缩或膨胀。(5)有良好的保护作用,使材料固定后能经久保20~50倍,否则材料中的水分会稀释固定剂的浓度,降低存不

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