类风湿因子免疫吸附剂的制备及性能研究

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1、类风湿因子免疫吸附剂的制备及性能研究重庆大学硕士学位论文（学术学位）学生姓名：毛金春指导教师：王翔教授专业：生物医学工程学科门类：工学重庆大学生物工程学院二O一四年三月PreparationofImmuneAdsorbentforRheumatoidFactorandStudiesonPropertofAdsorptionAThesisSubmittedtoChongqingUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementfortheMaster’sDegreeofEngineer

2、ingByMaoJinchunSupervisedbyProf.WangXiangSpecialty:BiomedicalEnginneringCollegeofBioengineeringChongqingUniversity,Chongqing,ChinaApril2014重庆大学硕士学位论文中文摘要摘要类风湿关节炎是一种以关节滑膜炎为特性的慢性全身性自身免疫性疾病，期间产生大量的类风湿因子及其免疫复合物，进而诱发免疫性炎症。目前临床多采用药物为主，血液净化为辅的治疗方案。本文的目的是针对类风湿关节炎的血液净化治疗，制备

3、出具有吸附量高、选择性强、血液相容好、适合灌流的类风湿因子的吸附剂。原理：类风湿因子在生理条件下的呈正电性，有较强疏水性，本课题制备的以肝素（HEP）为连接臂，苯丙氨酸（PHE）为配基的树脂吸附剂（PS-PHE）具有较强的疏水性及配基上带有羧基(-COOH)，能通过离子健及疏水作用对类风湿因子进行吸附。方法：通过在氯甲基聚苯乙烯-二乙烯树脂（氯球，PS-Cl）的表面接枝苯丙氨酸（PHE），制备出可供临床应用的类风湿因子血液灌流吸附剂（PS-PHE），通过单一变量法来寻找接枝HEP以及苯丙氨酸的最佳条件；体外动态灌流实验测定吸

4、附剂的吸附率；体外动态洗脱实验测定RFs的脱落量及脱落率；通过体外灌流模拟实验，检测灌流对血液成分的影响来评价吸附剂的选择性；体外凝血酶原时间（PTs）及凝血酶时间（TTs）检测实验验证材料的血液相容性。结果：(1)接枝肝素的所需的最佳肝素浓度为6mg/mL,反应时间为24小时。肝素的接枝量为33.83g/g。(2)接枝苯丙氨酸的所需的最佳苯丙氨酸浓度为6mg/mL,反应时间为24小时。苯丙氨酸的接枝量为8mg/g。（3）免疫吸附剂对类风湿因子IgARF、IgGRF、IgMRF的吸附率分别可以达到45%1.80%、56%

5、1.36%、52%2.01%(n=5)，洗脱后脱落率分别为22%1.65%、19%1.06%、21%1.35%(n=5)。（4）全血灌流实验中材料对红细胞、血小板、总蛋白的吸附均在10%(n=4)以下。（5）同时体外凝血酶原时间（PTs）及凝血酶时间（TTs）测定结果显示PS-PHE能延缓凝血速度。讨论：以PS-Cl为载体，PHE为连接臂连接PHE的吸附剂(PS-PHE)对RF具有较高的吸附率及特异性并且表现出优良的血液相容性，在类风湿关节炎的临床治疗方面具有良好研究价值及应用前景。关键词：类风湿因子，免疫吸附剂，

6、苯丙氨酸I重庆大学硕士学位论文英文摘要ABSTRACTRheumatoidarthritisisachronicsystemicautoimmunediseasecharacterizedbyathrosynovitis,duringwhichproducelargeamountsofrheumatoidfactorandimmunecomplexesthatinduceautoimmuneinflammation.Hospitalsmainlyusedrug-basedtreatmentsupplementedbyperf

7、usion.Thepurposeofthisarticleistopreparerheumatoidfactorsadsorbentwithhighadsorptioncapacity,excellentselectivityandgoodbloodcompatibility.Principle:Rheumatoidfactorpositivechargeandhasstronghydrophobicunderphysiologicalconditions.Theadsorbentconnectedphenylalanine

8、toheparinhascarboxylgroup(-COOH),ItcanadsorbRFsthroughionicbondandhydrophobicinteraction.Methods:PS-Clactsascarrier,whichisconnectedwiththelinker