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1、内蒙古工业大学学报JOURNALOFINNERMONGOLIA第27卷第1期UNIVERSITYOFTECHNOLOGYVol.27No.12008文章编号:1001-5167(2008)0120049205X博落回果实中生物碱的提取分离与鉴定111222李发旺,索全伶,李强,潘志,魏雄辉,张建斌(1.内蒙古工业大学化工学院,呼和浩特010051;2.北京大学化学与分子工程学院,北京100871)摘要:本文提供了一套从博落回果实中提取、分离及纯化生物碱的有效方法.采用酸水浸提法,提取出总生物碱的粗提物,再用阳离子交换树脂吸附总碱,然后在索氏提取器
2、中,用混合有机溶剂提取吸附了总碱的树脂.在氮气保护下,利用柱层析方法,分离、纯化总碱,最后获得四种生物碱.通过波谱分析与表征,证实四种生物碱分别为:别隐品碱,原阿片碱,血根碱,白屈菜红碱.关键词:博落回果实;生物碱;提取;分离;表征中图分类号:TQ283文献标识码:A0引言博落回[MacleayaCortada(Willd)R.Br.]系罂粟科植物,在我国长江中下游地区广泛分布,因产地不同,而有不同的别名.国内外研究结果表明:博落回全草中富含苯并菲啶类生物碱,博落回中的生物碱具有驱虫、抗菌、消肿、止咳、平喘、镇痛、抗肿瘤等功效.临床已用于痔疮,脓
3、性指头炎,疔痛,滴虫性阴〔1〕道炎,宫颈糜烂等的治疗,效果显著.博落回中生物碱具有多种生物活性及药用价值,尤其是具有抗肿瘤作用,可能成为一种高效的抗癌〔2〕药物,因而倍受人们关注.江西民间郎中用博落回的鲜汁液治愈过膀胱癌,鲜汁液中富含生物碱,但具体是哪一种生物碱起作用,或者是这些生物碱协同起作用,目前尚未研究清楚.本文摸索出了一套有效提取、分离及纯化生物碱的方法,并从博落回总生物碱中分离出四种生物碱纯品,从而为进一步研究抗癌机理奠定了基础.本文采用酸水浸提法提取博落回总生物碱,再用阳离子交换树脂富集总生物碱,利用混合有机溶剂在索氏提取器中萃取树脂
4、,得到总生物碱粗品,最后利用柱层析技术,分离、纯化出四种生物碱纯品.〔3〕国外研究已经证实,在光照下,血根碱类生物碱易发生氧化,很难得到纯品.因此,本文采用氮气保护分离、纯化血根碱及白屈菜红碱的技术,效果良好.1实验材料1.1仪器RE252AA型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);层析柱(1500×80cm,中科院过程所定做);LCQDecaxpPLUS型质谱仪(美国Thermo2Finnigan公司);SYSTEM2000型红外光谱仪(美国PERKIN2ELMER公司);MercuryPlus2300M核磁共振波谱仪(美国Varian公司);Va
5、rianPrepstarSD21型高压X收稿日期:2007201208基金项目:国家自然科学基金项目(No.20666003)作者简介:李发旺(1977～),男,硕士研究生通讯联系人:索全伶,教授,E-mail:szj@imut.edu.cn50内蒙古工业大学学报2008年液相色谱仪(美国Varian公司).1.2材料与试剂博落回的果实由江西博源实业公司提供,经该公司实地采集,晒干及鉴定,并将果实研成粗粉备用;薄层层析硅胶GF254(化学纯,青岛海洋化工有限公司);薄层层析板(0.7%聚乙烯醇铺板,110℃活化30min);聚苯乙烯磺酸型阳离子交
6、换树脂(型号:001×7型,北京化工厂);血根碱及白屈菜红碱盐酸盐标准品均购自SIGMA公司.液相色谱用乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯.2实验方法2.1博落回果实中总碱的提取〔4～6〕博落回果实中总碱的含量较其他部位高,为了提取这些生物碱,文献报道了多种方法:酸水热提法,醇提法,微波提取等.本文在前人工作基础上,取500g博落回果实粉碎后置于下口瓶中,利用pH=2的稀盐酸溶液冷浸提取,反复浸取三次,每次七天,将浸取液合并离心去除糖份,将红棕色清液浓缩.将浓缩液用阳离子交换树脂吸附后滤去水分,低温真空干燥后置于索氏提取器中,再以氯仿∶甲醇(2∶1
7、,v∶v)混合溶液作为提取液,在65℃下进行提取至提取液变为无色,合并提取液,离心去除杂质,〔4〕旋转蒸发去除有机溶剂,得到红棕色博落回总生物碱盐酸盐4.80g,提取率为0.96%,比文献报道的收率有所提高.2.2生物总碱的分离将2g总生物碱用大量乙酸乙酯溶解,过滤,滤液用氯仿萃取,萃取液浓缩后在硅胶(300～400目)层析柱上分离,用氯仿ö甲醇ö氨水(60∶4∶1.5)为洗脱剂,得到两带,用氯仿2甲醇重结晶后,分别得到化合物É和化合物Ê.不溶物缓慢滴加25%氨水,调pH值至8～9,静置一段时间后在暗室用氯仿萃取.在氮气保护下,萃取液浓缩后在硅胶
8、(300～400目)层析柱上分离.用苯ö乙醇(35∶1)进行淋洗得第一带为红色带,再用苯ö乙醇(25∶1)洗脱第二带为黄色带.收集过程中
