加工番茄花药培养技术研究.pdf

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1、ResearchonantherculturetechnologyofprocessingtomatoADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofAgricultureByLiShu-hong(Crop)DissertationSupervisor:Prof.ZhuHua-guoJune,2018石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除文中

2、已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确的说明并表示谢意。研究生签名:时间:年月日使用授权声明本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。研究生签名:时间:年月日导师签名:时间:年月日摘要为确定适宜于加工番茄花药愈伤组织诱导的最佳取材时期和激素组合,以2个加工番茄

3、CK8和CK3的花药为试验材料,以醋酸洋红液为染液,压碎法制片,用体视显微镜观察小孢子的发育时期;以MS培养基为基础培养基,添加不同浓度的植物激素2,4-D、NAA、KT、6-BA、ZT、TDZ进行花药离体培养,研究不同植物激素浓度和组合对加工番茄花药愈伤组织诱导的影响。试验结果如下:(1)加工番茄花药小孢子发育时期的测定:番茄花蕾的颜色和大小可以作为判断小孢子发育时期的一个简单而可靠的指标,对加工番茄CK8和CK3。当花蕾小、完全闭合、萼片紧包被花瓣、呈绿色、花蕾纵径为2.44-2.96mm、横径为1.48-1.63mm时,绝大多数小孢子处在花粉母细胞时期;当花蕾稍大、仍完全闭合、萼片仍紧包

4、花瓣、呈绿色、花蕾纵径为3.32-4.08mm、横径为1.60-2.19mm时,绝大多数小孢子处在四分体时期;当花瓣低于萼片、萼片呈绿色、花瓣呈浅绿色、花蕾纵径为3.99-5.26mm、横径为2.04-2.33mm时,绝大多数小孢子处在单核中期;当花瓣稍微低于萼片、呈绿色、花瓣呈浅绿色、发淡黄、花蕾纵径为5.34-6.05mm、横径为2.25-3.07mm时,绝大多数的小孢子发育时期处在单核靠边期。(2)不同激素组合及浓度对加工番茄花药培养的影响:激素在番茄花药培养中起着非常重要的作用,在MS培养基中,添加不同浓度的生长素2,4-D、NAA与不同浓度的细胞分裂素KT、6-BA、ZT、TDZ,结

5、果表明,0.5mg/L2,4-D+0.05mg/LTDZ、0.1mg/L2,4-D+2.0mg/L6-BA、0.1mg/L2,4-D+0.05mg/LTDZ是适宜于品种CK8花药愈伤组织诱导的激素组合,诱导率均在56%以上;0.5mg/L2,4-D+0.1mg/LTDZ也是适宜于品种CK8花药愈伤组织诱导的激素组合,诱导率在52%以上。0.1mg/L2,4-D+0.1mg/LTDZ是最适宜品种CK3愈伤组织诱导的激素组合,诱导率可达58.04%;0.1mg/L2,4-D+2.0mg/L6-BA对品种CK3的诱导率次之,为55.05%;0.1mg/L2,4-D+1.0mg/L6-BA对品种CK3

6、的诱导率也很高,诱导率可达51%以上。2,4-D+TDZ组合对品种CK8的诱导率优于其他组合,而2,4-D+6-BA组合对品种CK3的诱导率优于其他组合。番茄花药愈伤组织的分化诱导:品种CK3的花药经诱导培养基MS+0.5mg/LNAA+0.05mg/LTDZ和继代MS+0.5mg/LNAA+0.5mg/LKT培养后,在分化培养基MS+0.2mg/LNAA+0.5mg/LKT上,诱导出了胚性愈伤组织。(3)基因型对加工番茄花药愈伤组织诱导的影响:不同基因型材料花药培养愈伤组织的诱导率不同,试验所接种的两个基因型番茄的愈伤组织诱导率CK8为18.63%,CK3为14.19%。(4)4℃低温预处理

7、对加工番茄花药愈伤组织诱导的影响:接种前对两个基因型加工番茄CK8和CK3花药进行4℃低温预处理2d、5d,结果发现,两个基因型加工番茄花药经过4℃低温预处理2d和5d的愈伤组织诱导率差异均不明显。关键词:番茄;小孢子发育时期;花药培养;愈伤组织诱导IAbstractTodeterminethesuitablestagesandhormonescombinationsforinducingcall

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