mir-34a在甲状腺癌中的表达及意义

《mir-34a在甲状腺癌中的表达及意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、温州医学院硕士学位论文论文题目：丛i8二垒垒鱼查里趑腿疸生的麦达壁童竖论文评阅人：答辩委员会主席：塑垒查答辩委员会成员：胡窆壹论文答辩日期：粱勇隆褪贤2013．5．261温少I'1医学院硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．3英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．17分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．23参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．28附录⋯⋯⋯⋯⋯．j⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32致

2、谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．33综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．34参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．452温州医学院硕士学位论文MiR-34a在甲状腺癌中的表达及意义中文摘要MicroRNA，简称miRNA，是近年来分子生物学和遗传学领域的研究热点。MiRNA是一类新近发现的全长约为21-25个核苷酸长度的内源性非编码单链小分子RNA，它的主要作用是通过绑定下游靶基因的mRNA上互补的3’一非翻译区来下调蛋白的表达，从而发挥对细胞增殖，分化，侵袭和凋亡等过程的调控作用，并且与许多肿瘤的

3、发生，发展相关。有证据显示miRNh在癌与正常细胞之间存在差异表达。miRNA的异常表达可通过调节参与癌症相关进程的基因及旁路途径影响肿瘤的进展，提示其可能扮演着类似于抑癌基因或原癌基因的角色，调控着肿瘤细胞多种重要的生物学行为。甲状腺癌是最常见的内分泌恶性肿瘤，约占人类所有恶性肿瘤的卜2％，近年来许多研究显示其发病率呈不断上升的趋势⋯。临床中最常见的类型为甲状腺乳头状癌(PTC)，约占甲状腺癌的80％乜1，早期易发生区域淋巴转移，转移率可达30-50％口3。目前，甲状腺癌的发病机制尚不是十分清楚。近年来研究发现甲状腺癌中可见一些miRNAs表达异常，2005年

4、He等H3亦首次揭示了甲状腺乳头状癌(PTC)及甲状腺正常组织中miRNAs的表达谱。本研究，我们在前期高通量的生物芯片技术筛检甲状腺癌中异常表达的microRNA的研究基础上，参考国内外相关文献报道，确立了miR一34a作为我们研究的重点。利用Northernblotting技术和实时荧光定量RT—PCR技术检测miR-34a在甲状腺癌组织与癌周非瘤组织中的表达差异，并评估它与甲状腺癌临床病理资料的关系，通过细胞转染后的细胞增殖检测(MTS)和流式细胞仪技术分析miR一34a对甲状腺癌增殖和细胞周期的影响，初步探讨其在甲状腺癌发生，发展中的作用。目的：探讨甲状

5、腺癌中miR-34a的表达及其与临床病理资料的联系，并探讨其对甲状腺癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法：甲状腺癌病人术后的肿瘤和癌周非瘤组织标本共42例被收集和提取纯化得高质量的RNA，运用Northernblotting及实时荧光定量RT—PCR技术检测miR-34a在甲状腺癌组织及癌周非瘤组织中的表达水平，采用scionimage软件和2-Asc,算3温州医学院硕士学位论文法量化miR一34a表达的相关数据，并将其与术后病理参数相联系，统计学分析miR一34a之于甲状腺癌临床病理资料间的关系。细胞水平上，通过转染miR一34a成熟体入甲状腺癌细胞株(BHP和A

6、RO细胞)，利用MTS法和流式细胞仪等方法检测其对细胞增殖和细胞周期的影响。结果：1．Northernblotting及实时荧光定量RT—PCR结果均显示miR-34a在人甲状腺癌组织中较相应癌周非瘤组织呈现显著性高表达。2．荧光实时定量RT—PCR发现甲状腺癌组织中miR一34a的表达水平与肿瘤大小和恶性程度呈现负相关，miR一34a表达越高，其肿瘤越小，恶性程度越低。反之则更易出现高分期，多灶性及大病灶的甲状腺癌，各组间具有统计学差异。3．转入miR-34a成熟体的甲状腺癌细胞株BHP和ARO细胞的生长增殖水平均显著降低，且BHP细胞被阻滞在GO／G1期，分

7、裂期细胞显著减少，而ARO细胞似乎对miR-34a的细胞周期阻滞作用不敏感。结论：甲状腺癌组织中的miR-34a较癌周非瘤组织高表达，但其在甲状腺癌中的表达水平与肿瘤的大小和恶性程度呈现负相关。MiR一34a可能在甲状腺癌发生的早期作为自身保护性因素被诱导调高，其通过调控细胞周期，抑制细胞增殖等因素对抗甲状腺癌的发展，这可能是部分甲状腺癌预后良好的因素之一。MiR一34a在甲状腺癌后期的诱导表达缺失或不足，或其他机制导致甲状腺癌细胞对miR一34a的作用不敏感，可能导致甲状腺癌的恶性程度增高，影响甲状腺癌的不良预后。关键词：miR一34a；甲状腺癌；Real—t

8、imeRT—PCR；No