自噬基因beclin+1与骨肉瘤发生、发展的相关性研究

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1、第二军医大学博士学位论文自噬基因Beclin1与骨肉瘤发生、发展的相关性研究姓名：杨诚申请学位级别：博士专业：骨外科学指导教师：贾连顺20080401第二军医大学博+论文前言英文缩写AcrATTCAIBisbpBSAcDNADABDDTDDWDEPC英文缩略词表英文全称AcrylamideAmericanTypeCultureCollectionApoptoticindexBis—acrylamideBasepairBovineserumalbuminComplementaryDNADiaminobenzidineDithiothreit01Doubledistilled

2、waterDiethypyrocarbonateDMEMDulbeccominimumessentialmediumDMSODimethylsulfoxideDNAEBE．coliEDTAEPFACSGFPHRPIgKbKDDeoxyribonucleicacidEthidiumbromideEschefichiacoliEthylenediaminetetraaceticacidEppendorfFlowcytometryGreenfluorescentproteinHorseRadishPeroxidaseImmunoglobulinKilobaseKilodalto

3、n8中文对照丙烯酰胺美国标准培养收集所细胞凋亡指数双丙烯酰胺碱基对牛血清白蛋白互补DNA．二氨基联苯二硫代苏糖醇双蒸馏水焦碳酸二乙酯DMEM培养基二甲基亚砜脱氧核糖核酸溴化乙锭大肠杆菌乙二胺四乙酸EP管流式细胞术绿色荧光蛋白辣根过氧化物酶免疫球蛋白千碱基千道尔顿第二军医大学博士论文刖舌LALBmlnLuria-BertanimediumcontainingAmpLuria．BerranimediumminutemRNAmessengerRNAMTXODOligo—dTPBSPCRPIRN公rpmRT．PCRMethotrexateOpticalDensityOligode

4、oxythymidylicacidPhosphate—bufferedsalinePolymerasechainreactionPropidiumiodideRibonucleicacidroundperminuteReversetranscriptionpolymerasechainreactionsecsecor,dLA培养基LB培养基分钟信使RNA甲氨碟呤光密度寡脱氧胸苷酸磷酸缓冲盐溶液聚合酶链反应碘化丙啶核糖核酸每分钟转数逆转录聚合酶链技术秒SDS-PAGEsodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegel十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺Elect

5、ropheresisTAEbuf-ferTris．Acetate．EDTAbuf．ferTEMEDN，N，N’，N'-trtramethylethylenediamineTriSUVTrihydroxymethylaminomethaneultravioletray9凝胶电泳三羟甲基氨基甲烷一乙酸一乙二胺四乙酸缓冲液N，N，N’，N’．四甲基乙二胺三羟甲基氨基甲烷紫外光独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作

6、了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名：孝匆0氛签字日规!口g锄月跏日学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作声签名：辛杉．板签字日期：汐8年华月矽日导师签名签字日期第二军医人学博十论文摘要摘要背景骨肉瘤是严重危害人类健康的恶性肿瘤，转移发生早，预后差。目前临床

7、上对骨肉瘤的治疗多采用手术、化疗等综合治疗，虽然五年生存率较前有明显提高，但疗效仍不满意。大剂量化疗带来的严重副反应以及多药耐药等问题使得骨肉瘤的治疗难以完全治愈。基因治疗可能成为那些已丧失手术时机患者的新的治疗手段。研究表明，肿瘤细胞恶性增殖，死亡的减少与肿瘤的发生、发展的密切相关。并且使细胞耐受放疗、化疗的刺激。因而，诱导肿瘤细胞死亡成为了一种新的杀伤肿瘤细胞的治疗策略。自噬性细胞死亡是一种不同于凋亡、不依赖caspase的程序性细胞死亡。有研究表明自噬的抑制与肿瘤的发生有关，沉默自噬基因Beclinl可导致多种恶性肿瘤的